Анализ на антиядерные (антинуклеарные) антитела: показания, методика, интерпретация

 Название: Антинуклеарные антитела (ANA).

Анализ на антиядерные (антинуклеарные) антитела: показания, методика, интерпретация Антинуклеарные антитела (ANA)

 Антиядерные антитела (АНА, АНА). Специфические иммуноглобулины, которые связываются с компонентами клеточных ядер собственного организма. Определяется в плазме при ревматических заболеваниях, первичном билиарном циррозе, злокачественных опухолях, инфекциях.

Исследование используется для диагностики и дифференциации аутоиммунных заболеваний в контексте скрининга и представления характерных клинических признаков. Кровь взята из вены. Анализ проводится тремя способами: методом иммуноферментного анализа (определяется общий уровень АНА), методом иммуноблота и косвенной иммунофлуоресцентной реакцией (обнаружено до 15 типов АНА).).

Обычно результат отрицательный. Продолжительность теста с ИФА составляет 1 день, с иммуноблоттингом, ИИФ — 8 дней.

 Обычно клетки мертвого тела фагоцитируются макрофагами. При аутоиммунном заболевании возникает не только использование клеточных компонентов (ядрышки, гистоны, ядра), но и передача информации о них в структуре иммунного ответа. В-лимфоциты запускают выработку антител против ядерных антигенов.

Полученные иммунные комплексы фиксируются в базальных мембранах сосудов и органов крови, активируется система комплемента и развивается местное воспаление. Исследование ANA с использованием иммуноферментного анализа имеет низкую специфичность, но является экономичным с точки зрения времени и трудозатрат.

Иммуноблоттинг и метод RNIF предоставляют очень специфическую информацию, но их распространение ограничено трудоемкостью и высокой стоимостью процедуры.

Анализ на антиядерные (антинуклеарные) антитела: показания, методика, интерпретация Антинуклеарные антитела (ANA)  Тест на антиядерные антитела назначают при аутоиммунных заболеваниях. Показания к общему определению IgG, IgM, IgA с помощью ИФА:  • Скрининг на коллагеноз. Тест используется для обследования людей с риском неспецифических и легких симптомов: усталости, лихорадки, головной боли. Положительный результат является основой для проведения более точных и более длительных диагностических процедур.  • Диагностика СКВ. Анализ назначается пациентам с характерными клиническими проявлениями: боль в мышцах и суставах, сыпь, одышка, нарушения ритма сердца, отеки.  • мониторинг СКВ. Определение АТ периодически проводится для выяснения активности патологии, составления прогноза, оценки эффективности лечения.  • Диагностика красной волчанки. Тест проводится у пациентов, принимающих препараты, которые могут вызвать синдром волчанки.  Определение антиядерных антител с помощью иммуноблоттинга и REIT используется более узко. Показания к применению:

 • Дифференциация аутоиммунных заболеваний.

Цель исследования — выявить СКВ, синдром Шарпа, синдром Шегрена, склеродермию, полимиозит, дерматомиозит, ревматоидный артрит, первичный билиарный цирроз и первичный склерозирующий холангит.

В основе лежит высокий уровень антител против ядерных антигенов (ИФА), против выделенного ядерного антигена, против ДНК, против нуклеосом в сочетании с характерной клинической картиной.

 • Мониторинг ревматических заболеваний. Тест проводится для выявления обострений, оценки течения и эффективности лечения артрита, остеоартрита, васкулита и диффузных заболеваний соединительной ткани.  Уровень АНА определяется в венозной крови. Ваш забор производится утром, никакой специальной подготовки не требуется, но вы должны соблюдать общие правила:  • Поддерживать 4-6-часовой период голода. Питьевая вода разрешена без ограничений.  • Ограничьте потребление жирной пищи накануне вечером в течение дня, чтобы отказаться от алкогольных напитков для интенсивных физических нагрузок. Избегайте влияния стрессовых факторов.  • Через 7-10 дней расскажите своему врачу о лекарствах, которые вы используете. Ваше действие будет учтено при интерпретации результата.  • Физиотерапевтические процедуры, инструментальные обследования, выполняемые после сдачи крови.  • В течение 30 минут воздерживаться от курения, умеренных физических нагрузок.

 Кровь собирается в локтевой вене и отправляется в лабораторию в герметичной пробирке. Предварительно сыворотку выделяют из первичного биоматериала. При определении общего количества антиядерных антител проводят иммуноферментный анализ; при изучении их разновидностей иммуноблот, косвенная иммунофлуоресцентная реакция. В первом случае результат готовится за 1 день, во втором — через 8 дней.

 Обычно АНА в плазме отсутствуют или определяются в небольших количествах, не влияя на функцию тканей. Отрицательный результат выражается по-разному в зависимости от того, как проводится тест:  • ИФА — 0-1,0 U, «отрицательный».  • Иммуноблот — «не обнаружено» (общий вывод / для каждого типа ТП).  • RNIF — менее 1: 160.

 На конечный показатель не влияют физиологические факторы. Нормальный результат не исключает заболевания, но снижает риск патологии.

 Интерпретация увеличенной оценки теста зависит от метода исследования. При определении уровня общего АНА причинами увеличения его концентрации являются:  • Аутоиммунные заболевания. Положительный результат выявляет СКВ, ревматоидный артрит, синдром Шегрена, склеродермию, сахарный диабет 1 типа, полимиозит, дерматомиозит, миастению, щитовидную железу и печень.  • Инфекции. Повышенную ценность определяют у людей с туберкулезом, вирусным гепатитом, подострым бактериальным эндокардитом, ВИЧ-инфекцией.  • онкопатология. Образование ANA более характерно для рака легких и печени.  • лекарства. Скорость теста увеличивается с использованием ингибиторов АПФ, бета-блокаторов, гидралазина, пропилтиоурацила, хлорпромазина, лития, карбамазепина, фенитоина, изониазида, миноциклина, гидрохлоротиазида, ловастатина, симвастатина.

 При анализе с определением типа антиядерных антител интерпретируется увеличение индивидуальных показателей. Когда выполняется иммуноблот, происходит разделение видов AT. В RNIF доминирующие антитела обнаруживаются по природе свечения.

Отклонениями от нормы могут быть LES, синдром Шарпа, синдром Шегрена, склеродермия, ревматоидный артрит, синдром волчанки у новорожденных, полимиозит, изолированный синдром Рейно, волчанка, синдром КРЕСТ, полимиозит, полимиозит, дерматомиозит, красная волчанка, билиарный цирроз.

Клиника Цена Телефон
Клиника Андрологии во 2-м Сыромятническом переулке г. Москва , 2-й Сыромятнический пер., д. 10м. Чкаловская +7(495) 916..показать+7(495) 916-13-30+7(495) 916-23-17+7(495) 916-07-35
МедФорд на Авиамоторной г. Москва , ул. Авиамоторная, д. 4, корп. 3м. Авиамоторная +7(495) 011..показать+7(495) 011-00-30+7(499) 390-18-59
Медицинский центр иммунокоррекции им. Ходановой РН г. Москва , ул. Давыдковская, д. 6м. Славянский бульвар +7(499) 445..показать+7(499) 445-40-83+7(495) 740-61-75
Юнимед-С на 26-ти Бакинских Комиссаров г. Москва , ул. 26-ти Бакинских Комиссаров, д. 11м. Юго-Западная +7(495) 135..показать+7(495) 135-50-10
ФГБНУ НИИ глазных болезней г. Москва , ул. Россолимо, д. 11 корп. А, Бм. Парк Культуры +7(499) 409..показать+7(499) 409-04-69+7(499) 248-01-28+7(499) 248-78-92+7(499) 248-04-69
Центральный клинический госпиталь ФТС г. Москва, Открытое шоссе, д. 32м. Щелковская +7(499) 167..показать+7(499) 167-40-77+7(495) 781-03-15+7(495) 781-03-08
Инпромед на Азовской г. Москва , ул. Азовская, д. 24, корп. 3м. Севастопольская +7(495) 921..показать+7(495) 921-36-47
Инпромед на Зеленом проспекте г. Москва , Зеленый пр-т, д. 48, корп. 3м. Новогиреево +7(499) 921..показать+7(499) 921-36-47+7(495) 374-79-43
Инпромед на Ельнинской г. Москва , ул. Ельнинская, д. 20, корп. 2м. Молодежная +7(495) 374..показать+7(495) 374-79-43+7(495) 921-36-47
Инпромед на Бескудниковском г. Москва , Бескудниковский б-р, д. 20, корп. 5м. Петровско-Разумовская +7(495) 921..показать+7(495) 921-36-47
Инпромед на Молдагуловой г. Москва , ул. Молдагуловой, д. 3, корп. 3м. Выхино +7(495) 925..показать+7(495) 925-00-40+7(495) 374-79-53
МЦ Здоровье на Мира г. Санкт-Петербург, ул. Мира, д. 16м. Горьковская +7(812) 306..показать+7(812) 306-27-72
МЦ Здоровье на Лётчика Пилютова г. Санкт-Петербург, ул. Лётчика Пилютова, д. 6, корп. 2м. Проспект Ветеранов +7(812) 306..показать+7(812) 306-27-72
МЦ Здоровье на проспекте Королева г. Санкт-Петербург, пр-т Королева, д. 48, корп. 5м. Комендантский проспект +7(812) 306..показать+7(812) 306-27-72
ЭКО Био-Оптима на Большой Переяславской г. Москва , ул. Большая Переяславская, д. 7, стр. 1м. Проспект Мира +7(495) 980..показать+7(495) 980-40-28+7(495) 980-40-29
Морозовская детская больница (ДГКБ) г. Москва , 4-й Добрынинский пер., д. 1/9м. Октябрьская +7(495) 959..показать+7(495) 959-88-00+7(495) 959-88-03+7(495) 959-88-30+7(499) 764-56-80
Наталимед на Маршала Катукова г. Москва, ул. Маршала Катукова, д. 6м. Щукинская +7(499) 322..показать+7(499) 322-30-03
НДЦ клинической психиатрии на Алтуфьевском шоссе г. Москва , Алтуфьевское шоссе, д. 48, корп. 1м. Бибирево +7(495) 517..показать+7(495) 517-66-55+7(495) 517-66-11
Мед КВТ Центр в Большом Черкасском переулке г. Москва , Б. Черкасский пер., д. 13/14 стр. 3 АБВм. Китай-Город +7(495) 229..показать+7(495) 229-04-98+7(495) 627-07-06
Петергоф-мед г. Петергоф, ул. Разводная, д. 19, корп. 1м. +7(812) 420..показать+7(812) 420-66-96+7(812) 420-54-75+7(981) 776-66-96
ЛОР Центр на Новосущевской г. Москва , ул. Новосущевская, д. 21м. Новослободская +7(495) 540..показать+7(495) 540-55-56
ДКБ им. Семашко г. Москва, ул. Ставропольская, д. 23, корп. 1м. Люблино +7(499) 266..показать+7(499) 266-98-98
Тонус в Истре г. Истра, ул. Ленина, д. 6м. +7(498) 315..показать+7(498) 315-20-84+7(968) 404-84-52
Точный диагноз в Большом Демидовском переулке г. Москва , Большой Демидовский пер., д. 17/1м. Бауманская +7(499) 397..показать+7(499) 397-01-57+7(925) 049-92-11
ЦКБ №2 ОАО 'РЖД' г. Москва , ул. Будайская, д. 2м. Ростокино +7(495) 727..показать+7(495) 727-00-03+7(499) 187-08-17
Ретиноиды на Плеханова г. Москва , ул. Плеханова, д. 4, стр. 3м. Шоссе Энтузиастов +7(495) 785..показать+7(495) 785-31-89+7(916) 680-58-93
КДЦ Измайловский НМХЦ им. Пирогова г. Москва , ул. Нижняя Первомайская, д. 65м. Первомайская +7(499) 464..показать+7(499) 464-03-03
СЗЦ лазерной медицины в Ковенском переулке г. Санкт-Петербург, Ковенский пер., д. 11м. Маяковская +7(812) 275..показать+7(812) 275-42-42+7(921) 966-61-09
КДЦ НМХЦ им. Пирогова в Гагаринском переулке г. Москва , пер. Гагаринский, д. 37м. Смоленская +7(499) 464..показать+7(499) 464-03-03
Гемоскрин на Озерковской набережной г. Москва , Озерковская наб., д. 22/24, стр. 2м. Новокузнецкая +7(495) 953..показать+7(495) 953-27-57+7(962) 363-78-42
МЦ Здравия на Гурьянова г. Москва , ул. Гурьянова, д. 4, корп. 1м. Печатники +7(499) 722..показать+7(499) 722-46-28+7(495) 789-18-78+7(903) 589-18-78
Детский КДЦ НМХЦ им. Н.И. Пирогова г. Москва , ул. Нижняя Первомайская, д. 65м. Первомайская +7(499) 464..показать+7(499) 464-03-03+7(499) 463-65-30
НИИ педиатрии на Ломоносовском проспекте г. Москва , Ломоносовский пр-т, д. 2, стр. 1м. Университет +7(495) 967..показать+7(495) 967-14-20+7(499) 134-03-45+7(499) 134-08-39
Центральная п-ка ОАО 'РЖД' на Новой Басманной г. Москва, ул. Новая Басманная, д. 5м. Красные Ворота +7(499) 262..показать+7(499) 262-35-99+7(800) 234-34-34
Виталити на ул. Правды г. Москва , ул. Правды, д. 2Ам. Белорусская +7(495) 215..показать+7(495) 215-57-90+7(967) 103-02-81
Клиника кибернетической медицины г. Москва , ул. Миклухо-Маклая, д. 1610м. Беляево +7(495) 921..показать+7(495) 921-40-50+7(495) 410-15-70
Медсанчасть №165 г. Москва , Каширское шоссе, д. 13Гм. Каширская +7(499) 506..показать+7(499) 506-69-69+7(499) 611-11-79+7(499) 611-11-97+7(499) 506-69-66
МКНЦ им. А.С. Логинова на шоссе Энтузиастов г. Москва , шоссе Энтузиастов, д. 86м. Перово +7(495) 304..показать+7(495) 304-30-39
Ортека на Тверской г. Москва , ул. Тверская, д. 9м. Охотный Ряд +7(495) 775..показать+7(495) 775-50-00
Ортека на Химкинском бульваре г. Москва , Химкинский б-р, д. 21м. Сходненская +7(495) 775..показать+7(495) 775-50-00
Ещё клиник — 344. используйте фильтры
Читайте также:  Сдать биохимический анализ крови на С-реактивный белок

42a96bb5c8a2acfb07fc866444b97bf1 Модератор контента: Васин А.С.

Ана (антинуклеарные антитела)

Синонимы: АНА, антинуклеарные антитела, антинуклеарный фактор, АНФ, антиядерные антитела, antinuclear antibodies, ANAs, Fluorescent Antinuclear Antibody, Antinuclear factor, ANF

Научный редактор: М. Меркушева, ПСПбГМУ им. акад. Павлова, лечебное дело.

Аутоиммунные заболевания, когда иммунная система атакует собственные ткани организма, считаются одними из самых опасных. Большинство аутоиммунных патологий относятся к хроническим и могут вызывать серьезные нарушения в работе внутренних органов и систем.

Одним из наиболее распространенных тестов, применяемых в диагностике аутоиммунных состояний, является обследование на антинуклеарные антитела (АНА), который проводится тремя способами: 

  • методом иммуноферментного анализа ИФА (определяется общий уровень ANA), 
  • методом реакции непрямой иммунофлуоресценции РНИФ (выявляется до 15 разновидностей ANA)
  • методом иммуноблоттинга.

Общие сведения

Антинуклеарные (антиядерные) антитела представляют собой группу аутоантител, которые, вступая в реакцию с ядрами собственных клеток организма, разрушают их.

Поэтому анализ на АНА считается достаточно чувствительным маркером в диагностике именно аутоиммунных нарушений, большая часть из которых сопровождается поражением соединительной ткани.

Однако некоторые из видов антинуклеарных антител обнаруживаются и при заболеваниях не иммунной этиологии: воспалительных, инфекционных, злокачественных и пр.

Наиболее специфичны антинуклеарные антитела к следующим заболеваниям:

  • системная красная волчанка (СКВ) – заболевание кожи и соединительной ткани;
  • дерматомиозит – поражение кожи, мышц, скелетной ткани и т.д.;
  • узелковый периартериит – воспаление артериальной сосудистой стенки;
  • склеродермия – уплотнение и затвердение соединительной ткани;
  • ревматоидный артрит – поражение соединительной ткани суставов;
  • болезнь Шегрена – поражение ткани с железистыми проявлениями (снижение секрета слезных и слюнных желез).

Антинуклеарные антитела могут обнаруживаться более чем у 1/3 больных хроническим рецидивирующим гепатитом. Также уровень АНА может возрастать в случае:

  • инфекционного мононуклеоза (вирусное заболевание, сопровождается массовым поражением внутренних органов);
  • лейкоза (злокачественное заболевание крови) в острой и хронической форме;
  • гемолитической анемии (малокровие в результате разрушения эритроцитов);
  • болезни Вальденстрема (поражение костного мозга);
  • цирроза печени (хроническое заболевание, связанное с изменением структуры печеночной ткани);
  • малярии;
  • лепры (инфекционное поражение кожи);
  • хронической почечной недостаточности;
  • тромбоцитопении (снижение выработки тромбоцитов);
  • лимфопролиферативных патологий (опухоли лимфатической системы);
  • миастении (патологическая утомляемость мышц);
  • тимомы (опухоль из вилочковой железы).

Одновременно с определением антинуклеарных антител в процессе иммуноферментного анализа оценивается концентрация иммуноглобулинов: IgA, IgM, IgG. Обнаружение этих компонентов в крови может свидетельствовать о высокой вероятности развития ревматических заболеваний и коллагенозов.

В случае, когда связь между концентрацией антител и симптоматикой у больного не обнаруживается, само присутствие антиядерных антител в крови является диагностическим критерием и может повлиять на выбор лечения.

Сохранение высокого уровня антинуклеарных антител при продолжительном курсе терапии свидетельствует о неблагоприятном прогнозе заболевания.

Снижение значений АНА на фоне проводимого лечения может указывать на ремиссию (чаще) или приближающийся летальный исход (реже).

Также антинуклеарные антитела могут быть обнаружены у здоровых людей до 65 лет (3-5% случаев), после 65 (до 37%).

Показания

Исследовать антинуклеарный фактор целесообразно в следующих случаях:

  • Диагностика аутоиммунных и некоторых других системных заболеваний без ярко выраженной симптоматики;
  • Комплексная диагностика системной красной волчанки, ее формы и стадии, а также выбор тактики лечения и составление прогноза;
  • Диагностика лекарственной волчанки;
  • Профилактическое обследование пациентов с диагнозом красная волчанка;
  • Наличие специфических симптомов: продолжительная лихорадка без установленной причины, боли и ломота в суставах, мышцах, кожные высыпания, повышенная утомляемость и т.д.;
  • Наличие симптомов системных заболеваний: поражение кожи или внутренних органов (почки, сердце), артрит, эпилептические припадки и судороги, лихорадка, беспричинное повышение температуры и т.д.;
  • Назначение лекарственной терапии дизопирамидом, гидралазином, пропафеноном, прокаинамидом, ингибиторами АПФ, бета-блокаторами, пропилтиоурацилом, хлорпромазином, литием, карбамазепином, фенитоином, изониазидом, миноциклином, гидрохлортиазидом, статинами, поскольку есть риск развития лекарственной красной волчанки.

Кто дает направление

Помимо врача общей практики, направляют на анализ такие узкие специалисты, как 

  • ревматолог, 
  • дерматовенеролог, 
  • нефролог, 
  • педиатр.

Норма для АНА и факторы влияния

В норме антинуклеарные антител в плазме отсутствуют или определяются в небольшом количестве. Результат зависит от способа выполнения теста:

1. Тест делался методом ИФА

  • менее 0,9 пунктов – отрицательно (норма);
  • от 0,9 до 1,1 пунктов – сомнительно (рекомендуется сделать повторный тест через 7-14 дней);
  • более 1,1 пункта – положительно.

2. Для количественного анализа РНИФ нормой считается титр менее 1:160.
3. Иммуноблоттинг – норма «не обнаружено» (общее заключение / напротив каждого вида антител).

Что может повлиять на результат

  • нарушение правил подготовки пациентом или алгоритма венепункции медработником;
  • прием лекарственных препаратов (карбамазепин, метилдопа, пеницилламин, токаинид, нифедилин и др.);
  • наличие у пациента уремии (отравление продуктами белкового обмена) может дать ложноотрицательный результат.

Важно! Интерпретация результатов всегда проводится комплексно.

Поставить точный диагноз на основании только одного анализа невозможно.

Антинуклеарные антитела в крови (результат положительный)

Обнаружение антинуклеарных антител может указывать на следующие заболевания:

  • системная красная волчанка;
  • панкреатит (воспаление поджелудочной железы) аутоиммунной природы;
  • сахарный диабет I типа;
  • аутоиммунные поражения щитовидной железы;
  • злокачественные поражения внутренних органов;
  • дерматомиозит;
  • аутоиммунный гепатит;
  • заболевания соединительной ткани;
  • болезнь Шегрена;
  • миастения;
  • склеродермия;
  • ревматоидный артрит;
  • диффузный интерстициальный фиброз (поражение легочной ткани в хронической форме);
  • синдром Рейно (ишемия мелких концевых артерий) и т.д.

Повышение титра АНА при количественном иммуноферментном анализе (РНИФ) говорит о:

  • Системной красной волчанке в активной стадии – титр повышен до 98%;
  • Болезни Крона (гранулематозное поражение пищеварительного тракта) – около 15%;
  • язвенном колите (воспаление слизистой толстой кишки) – от 50 до 80%;
  • склеродермии;
  • болезни Шегрена;
  • Болезни Рейно – до 20%;
  • синдроме Шарпа (смешанное заболевание соединительной ткани);
  • лекарственной волчанке.

Важно! При расшифровке анализа важно понимать, что отрицательный результат не исключает наличия аутоиммунных нарушений у пациентов с характерной симптоматикой. Положительный результат без клинической картины аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом данных других лабораторных анализов.

Подготовка

Биоматериал для проведения ИФА на антинуклеарный фактор – сыворотка венозной крови.

  • Венепункция выполняется в утреннее время и натощак (с момента последнего приема пищи должно пройти минимум 8 часов). Пить чистую негазированную воду можно;
  • Непосредственно перед забором крови (за 2-3 часа) не рекомендуется курить и пользоваться никотинозаменителями (пластырь, спрей, жевательная резинка);
  • Накануне и в день процедуры нельзя употреблять алкогольные и энергетические напитки, волноваться и заниматься тяжелой физической работой;
  • За 15 дней до теста по согласованию с лечащим врачом отменяется прием лекарственных препаратов (антибиотики, противовирусные, гормоны и др.);
  • Для получения достоверного результата анализ желательно повторить через 2 недели.

Ответ ИФА можно ожидать в течение 1 суток после венепункции, а в экстренных ситуациях, когда обследование проводится по «cito» – около 3 часов.

Источники: 

  • Информация с сайтов лаборатории Инвитро и Хеликс;
  • Данные Национальной медицинской библиотеки США  PubMed.

Другие анализы ревматологического скрининга

Антиядерные антитела — ANA-скрининг | Университетская клиника

Анализ на антиядерные антитела — часть длительного процесса диагностики системных заболеваний соединительной ткани. При этом сложны и тесты и и их расшифровка. 

ANA-скрининг

Какие типы антиядерных антител нужно проверять? Когда следует проводить тест?

Что такое ядерные антитела

Антинуклеарные антитела — это аутоантитела, направленные против компонентов собственных клеточных ядер, например, ДНК и цитоплазмы. Их изучают для выявления аутоиммунных заболеваний, так как они  являются маркерами таких патологий.

Интерпретацию результатов анализов на антиядерные антитела затрудняет сложный механизм их образования. Наличие или отсутствие определенного антитела не всегда означает процесс заболевания. 

Антиядерные антитела – типы

В медицине выделяется несколько типов аутоантител:

  • Антитела к экстрагируемым ядерным антигенам (анти-ENA):
    • против ДНК-топоизомеразы I (анти-Scl70);
    • против рибонуклеопротеина (анти-РНП);
    • против антигена Смита (анти-Sm);
    • анти-Mi2 / Mi2;
    • анти-Ро (СС-А);
    • анти-La;
    • анти-jo1;
    • анти-PM-SCL;
    • анти-Kn;
  • Белок, образующий ядро ​​клетки анти-gp-2010 (анти-gp-210);
  • Антитела против нативной двухцепочечной ДНК (анти-дсДНК);
  • Антиконцентромерные антитела (анти-АСА).

Антиядерные антитела – формирование и механизм действия

Аутоиммунитет — это неправильный ответ иммунной системы на собственные ткани, что приводит к появлению аутоиммунных заболеваний.

Описаны различные механизмы аутоиммунитета, один из которых связан с высвобождением антигенов, скрытых от иммунной системы, например, в результате повреждения воспалительной ткани. В итоге высвобождаются элементы, обнаруженные в ядре клетки, например, ДНК, РНК, гистоны, которые иммунная система начинает распознавать как нечто чужеродное и вырабатывать против них антиядерные антитела.

Патогенез аутоиммунитета

Антиядерные антитела – показания к анализам

Анализы на антиядерные антитела назначаются при сомнительных диагнозах редких заболеваний. К ним, например, относятся: системные заболевания соединительных тканей, аутоиммунный панкреатит, билиарный цирроз, некоторые раковые опухоли. 

  1. Скрининг ANA особенно рекомендуется при симптомах аутоиммунных заболеваний, включая красную волчанку:
  • длительная лихорадка с неизвестными причинами;
  • суставной синдром;
  • высыпания  на коже;
  • постоянная слабость и др. 
  1. При артралгии/артрите, пневмоните, перикардите, эпилепсии и поражениях почек.
  2. При подтвержденном диагнозе СКВ (2 раза в год). 
  3. При приеме лекарств: прокаинамида, дизопирамида, пропафенона, гидралазина и т.п..
Читайте также:  Как выявить нефрокальциноз у взрослых и детей

Артрит Эпилепсия

При положительном ответе, пациента необходимо обследовать и далее, проводя более специфичные тесты. Например:

  • При симптомах системной склеродермии важно выявить анти-Scl-70. 
  • Для подтверждения билиарного цирроза делают антитела к митохондриям. При этом отрицательный ответ ANA не исключает аутоиммунного заболевания.
  • При симптомах СКВ требуется сделать тест на антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA). Наличие анти-dsDNA в сочетании с клиническими признаками болезни подтверждает диагноз, даже при отрицательном ANA.

Конкретных показаний для этих сложных анализов довольно много:

  • Подозреваемые заболевания соединительной ткани:
    • системная красная волчанка (наличие антител у 95-100% пациентов; специфический маркер заболевания  — антитела против дцДНК);
    • лекарственная волчанка (95-100% пациентов);
    • антифосфолипидный синдром (40-50% пациентов);
    • системный склероз (80-95% пациентов, особенно антитела против Scl70);
    • полимиозит и дерматомиозит (40-80% пациентов, особенно антитела против Jo1 и против Mi2);
    • синдром Шегрена (48-96% пациентов, особенно анти-Ro и анти-La антитела);
    • ревматоидный артрит (около 10% пациентов);
    • ювенильный идиопатический артрит (менее 10% пациентов);
    • синдром Рейно (20-60% пациентов);
    • фибромиалгия (15-25% пациентов);
    • смешанные заболевания соединительной ткани (95-100% пациентов);
  • Оценка активности заболевания и мониторинг эффективности лечения, например, антитела против дцДНК при системной красной волчанке;
  • Корреляция наличия антител с появлением специфических симптомов заболевания, например синдрома Шегрена, и наличия антител против Ro и против La;
  • Прогнозирование рисков заболеваемости.

Синдром Шегрена

Как проводится анализ на антиядерные антитела

  • Для выявления антиядерных антител берется кровь из вены на локтевом сгибе.
  • Методы, используемые для определения антител, очень разные и зависят от типа измеряемого антиядерного антитела. 
  • Это в первую очередь иммунологические методы, такие как:
  • ELISA;
  • РИА;
  • непрямая иммунофлюоресценция;
  • метод двойной иммунодиффузии;
  • вестерн-блот.

Для выявления антиядерных антител используется двухэтапная диагностика.

Сначала проводится скрининг-тест с использованием метода непрямой иммунофлюоресценции, характеризующегося высокой чувствительностью.

Методика заключается в иммобилизации на микроскопном предметном стекле клеток линии HEp-2, полученных из эпителиальных клеток человека. Клетки этой линии имеют в своей цитоплазме и в ядре антигены, связывающие патологические антитела из крови пациента.

После добавления сыворотки пациента на предметное стекло антиядерные антитела связываются со специфическими антигенами и видны под микроскопом благодаря специальным флуоресцентным маркерам.

Преимущество непрямой иммунофлуоресценции заключается в способности дифференцировать типы антител на основе типа флуоресцентного красителя. Например, светящееся гомогенное клеточное ядро ​​означает наличие антител против dsDNA или антител против ssDNA.

Положительный результат скрининг-теста должен быть подтвержден. Для этой цели используются очень специфические иммунологические методы, например вестерн-блот. После обнаружения присутствия и идентификации типа антиядерного антитела определяют его титр, то есть концентрацию сыворотки, при которой можно определить присутствие антител.

Антиядерные антитела – как интерпретировать результат?

Нормальные титры антиядерных антител должны быть ниже 1:40. Если результат скрининг-теста нотрицательный и отсутствуют клинические симптомы, указывающие на заболевание соединительной ткани, диагноз не распространяется на конкретные антитела, например, анти-дцДНК, анти-Sm.

Клинически значимыми титрами у взрослых считаются ≥ 1: 160, а у детей ≥ 1:40.

В случае положительных результатов предлагается интерпретировать результат анализа следующим образом:

  • Титр 1: 40-1: 80 – пограничный (слегка положительный). При отсутствии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани повторять тест или проводить контрольный тест не рекомендуется, так как результаты у большинства людей не меняются с годами.
  • Титр 1: 160-1: 640 – средне положительный. При отсутствии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани рекомендуется повторить анализ через 6 месяцев.
  • Титр ≥ 1: 1280 – высоко положительный. При наличии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани для диагностики заболевания требуется дополнительная специализированная диагностика.

Следует иметь в виду, что серологические тесты на антиядерные антитела являются частью сложного диагностического процесса, и положительный результат всегда следует интерпретировать в контексте клинической картины и появления характерных симптомов заболевания.

Антиядерные антитела с низким титром встречаются у 5% людей из здоровой популяции, и их частота увеличивается с возрастом. В 65 лет — до 37 %. Положительный ответ без симптомов необходимо подтверждать, учитывая дополнительные анамнестические, клинические и лабораторные результаты.

Кроме того, их присутствие обнаруживается при физиологических и патофизиологических состояниях, но в этих случаях антиядерные антитела не имеют диагностического значения.

В эту группу входят:

  • инфекции, например, туберкулез, сифилис, малярия;
  • заболевания печени, например, цирроз печени;
  • заболевания легких, например саркоидоз, асбестоз;
  • раковые заболевания, например лейкоз, лимфома, рак молочной железы, меланома;
  • кожные заболевания, например псориаз, красный плоский лишай;
  • состояния после трансплантации  органов, например, после пересадка сердца, пересадки почки;
  • использование лекарственных средств, например противоэпилептических препаратов, гидралазина, солей лития;
  • другие аутоиммунные заболевания, например. тиреоидит Хашимото, болезнь Аддисона, диабет типа I;
  • беременность (до 20% беременных).

Лейкоз Псориаз

Появление различных типов антиядерных антител характеризуется этнической изменчивостью. Например, у людей с кавказским системным склерозом анти-АСА антитела встречаются чаще, а у афроамериканцев и жителей Африки чаще выявляются реактивные антитела к топоизомеразе.

Что может повлиять на результат?

Ложноотрицательные результаты дают уремия и прием лекарств, ассоциированных с развитием лекарственной волчанки.

Диагностика аутоиммунных заболеваний и синдромов

Антиядерные (антинуклеарные) антитела, ANA — (от англ. anti-nuclear antibodies; в России широко распространен менее удачный синоним — АНФ, антинуклеарный фактор, который не отражает давно установленную биологическую природу явления) — антитела против основных компонентов ядра клетки (нуклеопротеиды, белки хроматина и др.).

При системных аутоиммунных заболеваниях, а также в процессе развития многих других патологических состояний происходит сенсибилизация лимфоцитов к собственным белкам организма и вырабатываются аутоантитела, направленные против антигенов компонентов клеточных ядер и цитоплазмы.

Образующиеся иммунные комплексы аутоантиген-аутоантитело откладываются на базальных мембранах различных тканей и органов (кожа, почки, синовиальные, серозные оболочки, мозг и т. п.), а также снабжающих их кровью сосудов, активируя систему комплемента и вызывая воспаление и повреждение тканей.

При этом повышается лизосомальная активность, выделяются медиаторы воспаления. Цитотоксическое действие оказывают фиксируемый иммунными комплексами комплемент и сенсибилизированные лимфоциты. Поражение сосудов на уровне микроциркуляторного русла лежит в основе системного повреждения соединительной ткани и паренхиматозных органов.

Исследование на антиядерные антитела проводят, если возникает подозрение на аутоиммунное заболевание или присоединение аутоиммунного компонента, играющего существенную роль в патогенезе многих нозоформ.

Тест на ANA высокочувствителен (до 98%) при системной красной волчанке, однако  положительные результаты могут наблюдаться при других коллагенозах и иммунокомплексных заболеваниях, а также при прочих заболеваниях, протекающих с развитием аутоиммунного компонента.

Результаты теста, полученные в разных лабораториях, могут отличаться вследствие особенностей использующихся методов. Поэтому полноценный лабораторный ответ при исследовании антинуклеарных антител обязательно должен включать описание использованного метода.

Очень обширный перечень антигенов, объединенных в понятие «ядерные», требует также обязательного уточнения, антитела к каким из них могут быть выявлены используемым методом, а к каким — не могут.

Иммунофлюоресцентные методы, в которых в качестве субстрата используются животные клетки, позволяют, помимо антиядерных антител, выявлять и дифференцировать также антитела к некоторым компонентам цитоплазмы, что расширяет их возможности.

Показания к назначению анализа: диагностика и дифференциальная диагностика системных заболеваний соединительной ткани (особенно СКВ), аутоиммунного гепатита, вирусного гепатита с аутоиммунным компонентом (индуцированным вирусами или лечебными вмешательствами), первичного билиарного цирроза, рассеянного склероза; выявление аутоиммунного компонента при различных заболеваниях, в патогенезе которых может играть роль аутоагрессия. Материал для исследования: сыворотка крови.

  • Для определения антинуклеарных антител используется методика непрямой иммунофлюоресценции с использованием в качестве субстрата клеток культивируемой линии Нер-2.
  • Все вышеперечисленные особенности обязательно отражаются в лабораторном заключении, где, помимо указания типа свечения и соответствующего ему наиболее вероятного типа антител, даются также рекомендации по трактовке результатов в смысле возможной ассоциации с конкретными нозоформами или синдромами, а также необходимые дополнительные лабораторные исследования.
  • Достоинством метода иммунофлюоресценции с использованием клеток злокачественных культивируемых линий является также возможность выявления антител к некоторым антигенам цитоплазматической локализации: митохондриям, актину, лизосомам и др.

Образец (исследуемая сыворотка крови) инкубируется с субстратом, если в сыворотке присутствуют аутоантитела к ядерным или цитоплазматическим антигенам, они связываются с соответствующими компонентами субстрата с образованием комплекса антиген-антитело, который выявляется конъюгатом — антителами против иммуноглобулинов человека, меченными ФИТЦ. В результате при изучении с помощью люминесцентного микроскопа выявляется специфическая флюоресценция соответствующих ядерных или цитоплазматических структур клеток. Использование в качестве субстрата клеток злокачественной культивируемой линии благодаря их особенностям (высокое ядерно-цитоплазматическое соотношение, крупные размеры, наличие большого количества митозов) позволяет оценить различные типы свечения, характерные для присутствия в образце крови широкого спектра антител к различным антигенам, имеющих различные клинические ассоциации.Следует иметь в виду, что часть из определяемых типов свечения является высокоспецифичной, четко ассоциирована с определенными заболеваниями и имеет вполне определенную диагностическую значимость, в особенности при выявлении в высоких титрах; однако некоторые антитела к различным антигенам могут давать сходные типы свечения, в таких случаях может требоваться дальнейшее обследование для уточнения конкретного антигена, к которому направлены аутоантитела. С другой стороны, определенный тип антител может встречаться при нескольких нозологических формах. Существуют также антитела (они встречаются редко), реагирующие исключительно с компонентами веретенного аппарата клеток; обычно они не связаны с аутоиммунными заболеваниями, и их обнаружение расценивается как ложнопозитивный, не имеющий клинических ассоциаций результат.Некоторые из выявляемых антиядерных и антицитоплазматических антител с характерными для них видами свечения и клиническими ассоциациями приведены ниже:

  • ядерный гомогенный тип — антитела (АТ) к ДНК (двух- и односпиральной), антитела к ДНП (дезоксинуклеопротеид — комплекс ДНК с гистонами), антитела к гистонам, антитела к другим компонентам хроматина (протамины и т.д.); клинические ассоциации — СКВ (анти-ДНК, антитела к гистонам — в высоких титрах); лекарственная волчанка, ревматоидный артрит (антитела к гистонам);
  • ядерный периферический тип — АТ к двухспиральной ДНК, гистонам; клинические ассоциации — СКВ, лекарственная волчанка);
  • ядерно-мембранный ламиновый тип — АТ  к ламинам (фибриллярным белкам мембраны ядра); клинические ассоциации — СКВ, линейная склеродермия, ревматоидный артрит, сочетанный синдром гепатит/тромбопения/анемия;
  • ядерно-мембранный кольцеобразный тип с крапчатым свечением цитоплазмы — антимитохондриальные антитела к компонентам митохондрий М2 (пируватдегидрогеназный комплекс), М3, М6; клинические ассоциации см. митохондриальный тип;
  • ядерные каналы — АТ к белкам комплекса канальцев ядерной мембраны; клинические ассоциации — полимиозит;
  • перихроминовый тип — АТ к перихромину; клинические ассоциации — СКВ;
  • гетерогенный ядерный РНП (рибонуклеопротеин) — АТ к различным компонентам матрикса ядра; клинические ассоциации — смешанное заболевание соединительной ткани (СЗСТ);
  • Sm/РНП  — АТ к ядерному РНП или Sm-комплексу; клинические ассоциации — СКВ, СЗСТ (антитела к Sm); синдром Шегрена, склеродермия, ревматоидный артрит, СКВ, дискоидная волчанка, вызванная прокаинамидом (антитела к РНП);
  • центромерный тип — АТ к центромере (кинетохору); клинические ассоциации — синдром CREST (кальциноз, феномен Рейно, дисфункция пищевода, склеродактилия, телеангиэктазия), склеродермия, первичный билиарный цирроз
  • ядерный крапчатый тип (NSP1) — АТ против слабо охарактеризованных белков, часто сочетающиеся с антителами к актину или митохондриям; клинические ассоциации — первичный билиарный цирроз (NSP1 + митохондриальный тип), хронический активный гепатит (NSP1 + актин);
  • ядрышковый гомогенный тип — АТ к нуклеолину и другим компонентам ядрышек; клинические ассоциации — сочетанный синдром полимиозита/склеродермии, склеродермия в основном с поражением почек;  
  • ядрышково-кластерный тип — АТ к фибриллярину (7-2-РНК), антитела к рибонуклеопротеину U3РНП; клинические ассоциации — склеродермия, обнаруживаемая в основном у молодых мужчин;
  • ядрышково-крапчатый тип — АТ к Scl-70 (АТ к топоизомеразе 1); клинические ассоциации — склеродермия;
  • митохондриальный (цитоплазматический) тип — АТ к М2 (пируватдегидрогеназный комплекс), М3, М6 компонентам митохондрий (антитела к М1 и М5 на клетках Hep-2 не выявляются); клинические ассоциации — первичный билиарный цирроз, лекарственная СКВ (антитела к М3, М6), хронический активный гепатит, синдром Рейнольдса, синдром Шегрена, ревматоидный артрит;
  • мелкокрапчатый (цитоплазматический) тип — АТ к различным цитоплазматическим белкам, например, SPR (signal recognition particle — частица, распознающая сигнал); клинические ассоциации — миозит;
  • перинуклеарный тип — АТ к антигенам Jo-7, PL1, PL7, PL12; клинические ассоциации — полимиозит, в основном в сочетании с соединительнотканным заболеванием легких; дерматомиозит;
  • рибосомальный тип — АТ к антигенам рибосом; клинические ассоциации — СКВ, в основном с неврологической симптоматикой, ревматоидный артрит, синдром Шарпа;
  • актин — АТ к актину (антитела к гладкой мускулатуре); клинические ассоциации — хронический активный гепатит, первичный билиарный цирроз;
  • тубулин — АТ к тубулину; клинические ассоциации — алкогольный цирроз, тиреоидит Хашимото, склеродермия, синдром CREST, феномен Рейно;
  • цитокератин — АТ к цитокератину; клинические ассоциации — ревматоидный артрит, склеродермия, СКВ.
Читайте также:  Как выявить спонтанный пневмоторакс

У здоровых лиц моложе 60 лет следует ожидать отрицательных результатов на антитела к компонентам ядра и цитоплазмы; в низком титре (слабоположительный результат) эти антитела все же обнаруживаются у 2-3% (по некоторым данным, до 10%) практически здоровых людей, однако никогда нельзя предсказать, не разовьется ли у этих людей аутоиммунное заболевание в будущем (так, по данным некоторых авторов, антитела к ДНК начинают выявляться задолго до начала клинических проявлений СКВ, латентный период может продолжаться годами). После  60 лет частота слабоположительных результатов с возрастом постоянно растет. Клиническая значимость этих результатов остается неясной; как правило, они выявляются только в первичном (скрининговом) разведении 1:40. Исходя из этого, при выявлении положительного результата в скрининговом титре 1:40 всегда необходимо титрование, как минимум до диагностического титра 1:80. В любом случае представляется целесообразным последующее регулярное клинико-лабо­ра­торное наблюдение лиц, у которых выявлены ANA в низком титре.

ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА Положительный результат предполагает наличие определенных заболеваний (см. ниже), однако, как и результат любых лабораторных исследований, может нуждаться в подтверждении или уточнении с помощью других методов, а также в установлении клинико-лабораторных корреляций.

Надо иметь в виду, что различные лекарственные препараты могут вызывать образование аутоантител (гидралазин, прокаинамид, фенитоин, карбамазепин, изониазид, хлорпромазин, пеницилламин, леводофа, пенициллин, фенилбутазон, пероральные контрацептивы, хинидин).

Наиболее частыми мишенями для этих ятрогенных аутоантител являются ядерные гистоны, что приводит к развитию гомогенного или гомогенного периферического типа свечения.

  • Системные поражения соединительной ткани:
  1. — системная красная волчанка (СКВ), — ревматоидный артрит,- синдром Шегрена, — склеродермия,- дерматомиозит,
  2. — узелковый периартериит и др.

    ;

  • Инфекции (туберкулез, инфекционный мононуклеоз, острый и особенно хронический вирусный гепатит, подострый инфекционный эндокардит, ВИЧ-инфекция и др.);
  • Хронический аутоиммунный гепатит, первичный билиарный цирроз печени;
  • Сахарный диабет (инсулинзависимый); 
  • Множественный склероз; 
  • Легочной фиброз;
  • Системные васкулиты.

Антинуклеарные антитела также могут выявляться при острых и хронических лейкозах, приобретенной гемолитической анемии, болезни Вальденстрема, малярии, хронической почечной недостаточности, тромбоцитопениях, лимфопролиферативных заболеваниях, миастении и тимомах.

Титры антинуклеарных антител при узелковом периартериите могут достигать 1:100, при дерматомиозите — 1:500, СКВ — 1:1000 и выше.

При СКВ тест на выявление антинуклеарных антител методом непрямой иммунофлюоресценции обладает высокой степенью чувствительности (до 98% по данным разных авторов), но умеренной специфичностью (78%), так как антинуклеарные антитела могут встречаться и при других, указанных выше, заболеваниях.

Для сравнения, тест определения антител к нативной ДНК с помощью ИФА в диагностике СКВ обладает значительно меньшей чувствительностью — 38% (т.к.

патогенетическую роль в развитии СКВ могут играть не только антитела к ДНК, но и антитела к гистонам, дезоксирибонуклеопротеину и многим другим ядерным антигенам); однако специфичность определения антител к нативной ДНК для диагноза СКВ является почти абсолютной (98%).

Клиническая интерпретация этих различий в чувствительности и специфичности разных лабораторных тестов в диагностике СКВ выглядит следующим образом: отрицательный результат обнаружения антител к нативной ДНК с помощью ИФА не исключает диагноз СКВ, обнаружение же этих антител практически со 100% вероятностью подтверждает диагноз.

Другая ситуация имеется в отношении АНФ: отрицательный (особенно многократный) результат обнаружения антинуклеарных антител методом непрямой иммунофлюоресценции делает диагноз СКВ (во всяком случае, активной формы) весьма сомнительным (т.к. метод обнаруживает практически все аутоантитела, встречающиеся при СКВ), обнаружение же антинуклеарных антител не всегда будет достаточным основанием для постановки диагноза СКВ, оно подтверждает наличие феномена аутоиммунитета и обычно требует для установления окончательного диагноза дальнейшей клинико-лабораторной дифференциации с учетом типа свечения, титра антител, проведения дополнительных уточняющих или подтверждающих тестов, рекомендованных лабораторией, сопоставления результатов с клинической картиной.

При СКВ корреляция между величиной титра ANA и клиническим состоянием обычно отсутствует, хотя сохранение высоких титров в течение длительного времени является неблагоприятным прогностическим признаком.

Снижение уровня антител предвещает ремиссию, но иногда — летальный исход (феномен потребления антител: при нарастающем аутоиммунном повреждении тканей темп высвобождения ядерных антигенов, с которыми связываются наработанные антиядерные антитела, превышает скорость синтеза новых аутоантител).

При склеродермии частота выявления антител к ядерным антигенам составляет 60-80%, их титр обычно ниже, чем при СКВ. При ревматоидном артрите часто встречаются СКВ-подобные формы течения, поэтому довольно часто выявляются ANA.

При дерматомиозите антитела к ядерным антигенам в крови встречаются в 20-60% случаев, при узелковом периартериите — в 17% (титр до 1:100), при болезни Шегрена — в 56% в сочетании с артритом и в 88% случаев — при комбинации с синдромом Гужеро-Шегрена.

При дискоидной (кожной) красной волчанке антинуклеарный фактор выявляется у 50% больных.

Частота обнаружения антинуклеарных антител при ревматическихзаболеваниях и у здоровых лиц (Насонова В.А. и др., 1997)

Заболевание Частота выявления ANA, % Титры
СКВ — активная форма 98-100 +++
Дискоидная красная волчанка 40 ++, +++
Лекарственная волчанка 100 ++
Системная склеродермия 70 ++, +++
Синдром Шегрена 60 ++, +++
Смешанное заболевание соединительной ткани 100 ++, +++
Болезнь Рейно 60 ++, +++
Ревматоидный артрит 40 +, ++
Ювенильный хронический артрит 20 +, ++
Полимиозит и дерматомиозит 30 +
Узелковый периартериит 17 +
Здоровые лица до 40 лет 3 +
Здоровые лица после 40 лет 25 +

Оставьте комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *