ПЦР анализ соскоба на Mycoplasma pneumoniae

ПЦР анализ соскоба на Mycoplasma pneumoniae

Синонимы: определение антител IgG к микоплазме пневмонии, антитела класса IgG к Mycoplasma pneumoniae, иммуноглобулины класса G к Mycoplasma pneumoniae, Anti-Mycoplasma pneumoniae – IgG, Mycoplasma pneumoniae Antibodies IgG, Mycoplasma pneumonia specific IgG.

Связанные тесты:  определение антител IgА к микоплазме пневмонии,  определение антител IgM к микоплазме пневмонии, выявление ДНК микоплазмы пневмонии.

Антитела класса IgG к микоплазме пневмонии служат маркерами текущего или недавно перенесенного респираторного микоплазмоза. Антитела класса IgG вырабатываются в крови через 2 – 4 недели после инфицирования и остаются в крови более 1 года.

Исследование позволит вашему врачу:

  • Подтвердить текущую микоплазменную инфекцию;
  • Провести дифференциальную диагностику микоплазменной пневмонии и других инфекционных заболеваний верхних дыхательных путей, таких как пневмонии, вызванные Staphilococcus sp., Streptococcus sp.;
  • Провести диагностику микоплазменной инфекции при хронических воспалительных заболеваниях дыхательных путей.

Исследование рекомендуется проводить при:

  • Кашле;
  • Насморке;
  • Боли в горле на протяжении нескольких недель;
  • Головных болях;
  • Болях в мышцах;
  • Интоксикации;
  • Повышении температуры и лихорадке;
  • Пневмонии с нетипичными симптомами.
  • Метод:
  • Иммуноферментный анализ (ИФА).
  • Материал для исследования:
  • Сыворотка крови.

Подготовка к исследованию

  1. Специальной подготовки не требуется.
  2. Особые условия:
  3. Предварительная запись не требуется.
  4. Формат выдачи результата:
  5. « положительный»,  «отрицательный», «сомнительный».

  6. Положительный результат может свидетельствовать о:
  • Текущей микоплазменной инфекции;
  • Хронической микоплазменной инфекции;
  • Перенесенной микоплазменной инфекции;
  • Реинфекции микоплазмой пневмонии (при этом отсутствуют IgM).

Отрицательный результат может свидетельствовать о:

  • Отсутствии заражения Mycoplasma pneumoniae;
  • Раннем периоде заболевания (IgG не успели выработаться).
  • При Сомнительном результате рекомендуется провести повторное исследование.
  • Комментарий:
  • Диагноз ставит лечащий врач на основании совокупности клинических и лабораторных данных.
ИсследованияСтоимость, руб.Срок выполнения 
Антитела класса IgM к микоплазме пневмонии 15.08 До 7 дней
Антитела класса IgG к микоплазме пневмонии 14.79 До 7 дней
ДНК микоплазмы гениталиум 9.85 1-3 дня
ДНК микоплазмы хоминис 9.51 1-3 дня
ДНК уреаплазмы уреалитикум и парвум 9.90 1-3 дня
Урогенитальные микоплазмы (микоплазма хоминис, уреаплазмы), полуколичественная оценка и чувствительность к антибиотикам Временно не делается До 3 дней

Определение ДНК Mycoplasma pneumoniae в мазках со слизистой оболочки носоглотки методом ПЦР в клинике "Ниармедик"

Вирус, ответственный за развитие гепатита В, принадлежит к семейству Hepadnaviridae. Данный вирус относится к ДНК-содержащим вирусам.

Строительный генетический материал вируса гепатита В представлен молекулой дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК). Симптомы течения вирусного гепатита В схожи с симптомами гепатита А.

 Клинические симптомы гепатита B могут быть весьма разнообразны: острое течение гепатита, бессимптомное течение, течение гепатита с нехарактерными для него симптомами.

Наиболее типичными симптомам гепатита B являются:

  • симптомы недомогания в виде плохого самочувствия, боли в мышцах и суставах;
  • затем происходит развитие желтухи, сначала желтеют белки глаз, затем кожа. Наблюдается повышение уровня билирубина (ответственного за пожелтение кожи);
  • иногда развивается холестатическая форма заболевания, т. е. наблюдаются признаки застоя желчи в печени;
  • желудочно-кишечные расстройства.

Диагностика гепатита В

По клиническим признакам невозможно отличить гепатит В от гепатита, вызываемого другими вирусными агентами, поэтому лабораторное подтверждение диагноза является обязательным. Лабораторная диагностика гепатита B проводится, начиная со второй недели от момента предполагаемого инфицирования.

Современные методы диагностики позволяют определить наличие вируса при отсутствии в крови зараженного человека антител, что позволяет диагностировать и начать своевременное лечение в максимально ранние сроки.

Наиболее известным и эффективным является метод диагностики ПЦР (полимеразная цепная реакция), позволяющий определить количество частиц ДНК вируса в крови зараженного человека.

Расшифровка результатов анализа на ДНК гепатита В

Количественное определение ДНК вируса гепатита B выполняется с помощью метода лабораторной диагности — ПЦР (полимеразная цепная реакция). Количественное определение содержания ДНК вируса в крови выполняется с целью проведения адекватной противовирусной терапии. Данный метод высокочувствительный, распознавание частиц ДНК начинается от 2×105 копий/мл.

Выполнение данного лабораторного исследования является прогностическим и выполняется с целью оценки стадии гепатита В и вероятности хронизации вирусного процесса. Получение результата в виде менее 2×105 копий/мл говорит об острой фазе течения гепатитом В.

 При таком результате хронизация гепатита B практически не наблюдается. При концентрации HBV ДНК от 2×105 МЕ/мл до 8×105 МЕ/мл риск перехода острой стадии в хроническую наблюдается в 30% случаев.

При значении более 8×105 МЕ/мл риск хронизации инфекционного процесса достаточно высок и составляет около 80%.

Микоплазменная пневмония

30.01.2018

Микоплазменная пневмония – атипичная легочная инфекция, возбудителем которой является Мycoplasma pneumoniae. Микоплазмы представляют собой одноклеточные микроорганизмы, занимающие на эволюционной лестнице промежуточное положение между бактериями и вирусами. Они присутствуют практически повсюду: в почве, воде, на растениях, в организме животных и человека. Но большая часть из них абсолютно безвредна.

Мycoplasma pneumoniae – вызывает воспалительные патологии дыхательных органов. Принимая во внимание, что микоплазмы являются постоянными «сожителями» человека, они обрели целый ряд механизмов, позволяющих им приспособиться к условиям обитания, и бороться с ними достаточно трудно.

Читайте также:  Анализ на определение антител IgG к острицам

В частности, легочная разновидность микоплазм во многом напоминает собственные клетки организма. Именно поэтому реакция иммунной системы на нее часто бывает запоздалой и смазанной, а диагностика и лечение микоплазменной пневмонии у детей проходит  гораздо сложнее, чем при вирусной и бактериальной формах.

Инфекция передается одним из наиболее распространенных и потенциально опасных путей – воздушно-капельным. Вспышки пневмонии атипичной формы обычно происходят в условиях городов.

Характерны сезонные колебания заболеваемости с пиком в осенне-зимний период. Микоплазменная пневмония наблюдается преимущественно у детей и подростков. Легочная инфекция чаще встречается в организованных коллективах с тесными контактами (в дошкольных, школьных и студенческих группах, у военнослужащих и др.), возможны семейные случаи инфекции.

Микоплазменная пневмония сопровождается частым мучительным и продолжительным кашлем со скудной вязкой мокротой, которая плохо эвакуируется, отмечаются боли в грудной клетке, может развиться обструкция бронхов. Интоксикация нерезко выражена. Физикальные изменения в лёгких отсутствуют или слабо выражены. Рентгенологическая картина весьма вариабельна.

В большинстве случаев выявляются поражения интерстиция, у части больных пневмония протекает по типу очаговой или сегментарной, иногда воспалительные изменения носят смешанный характер. Явления лёгочной недостаточности нехарактерны для этого вида пневмонии. Микоплазменная пневмония обычно имеет благоприятное течение, в редких случаях течение очень тяжёлое.

При диагностировании пневмонии, вызванной микоплазмами, применяются следующие виды диагностики:

Рентгенологическое обследование.

Четких признаков, говорящих о наличии именно микоплазменной формы воспаления легких, на ранних стадиях развития болезни не наблюдается. Рентгенологическая картина представляет собой типичную бронхопневмонию. Можно наблюдать легочный рисунок, выраженный более обычного.
  1. Бактериологический посев мокроты или зевных мазков.

    • Mycoplasma pneumoniae
    • относится к трудно культивируемым микроорганизмам;
    • процесс выделения занимает 3 — 5 недель и условия для проведения подобного исследования имеются далеко не в каждом медицинском учреждении.
    • При обычной микроскопии мокроты микоплазмы не выявляются.
  2. Серологический анализ крови на присутствие в ней специфических иммуноглобулинов.

Иммуноглобулины – это белки, вырабатываемые организмом в качестве ответной реакции на проникновение болезнетворного агента. Таков механизм возникновения иммунитета на то или иное заболевание. Эти показатели носят название IgG и IgM. Первичный иммунный ответ характеризуется синтезом IgM-антител через 1 — 3 недели с момента заражения, обнаружение которых свидетельствует об острой фазе инфекции.

Иммуноглобулины классов G появляются к концу 3 — 4 недели.

Диагноз микоплазменной респираторной инфекции подтверждает 4-кратная сероконверсия специфических антител в парных сыворотках крови.

4. С целью быстрой этиологической диагностики пневмонии при исследовании биологического материала рекомендуется использовать ПЦР-метод.

ПЦР-диагностика является одним из современных методов объективного обследования микоплазменной инфекции. ПЦР (полимеразная цепная реакция) — это метод, который позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой участок генетической информации (ДНК) возбудителя инфекции среди огромного количества других
  1. участков.
  2. Материалом для исследования является биологический материал, полученный из:
  3. — нижних дыхательных путей (мокрота при глубоком откашливании, аспираты из трахеи, мокрота, полученная в результате индукции посредством ингаляции гипертонического раствора натрия хлорида, жидкость бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ), получаемая с помощью фибробронхоскопии)

— при невозможности получения биологического материала из нижних дыхательных путей берут мазки из верхних дыхательных путей (объединенный мазок из носоглотки и задней стенки глотки). В этом случае при получении положительного результата следует считать этиологию пневмонии предположительно установленной.

Однако получение отрицательного результата ПЦР при исследовании мазков из верхних дыхательных путей не может свидетельствовать об отсутствии микоплазменной инфекции.

В этом случае рекомендуется серологическая диагностика с учетом совокупности результатов по обнаружению специфических антител классов IgM и IgG в парных сыворотках, исследуемых одновременно.

Диагностику микоплазменной пневмонии можно провести в лаборатории природно-очаговых и особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии по Тульской области», г.Тула, ул.Оборонная, д.114,

телефон (4872) 37-39-56.

Мы используем метод ПЦР, основанный на выявлении ДНК Мycoplasma pneumoniae с помощью гибридизационно-флуоресцентной детекции в режиме «реального времени». Этот метод обладает наибольшей специфичностью и чувствительностью. Чувствительность метода — 93%, специфичность — 98%.

Сдать анализ: Микоплазма (Mycoplasma pneumoniae) + Хламидия (Chlamydophila pneumoniae), соскоб, мокрота (методом ПЦР) | МедЛаб

Описание анализа:

Микоплазма (Mycoplasma pneumoniae) + Хламидия (Chlamydia pneumoniae) – лабораторное исследование мокроты или мазка на наличие возбудителей респираторного микоплазмоза и респираторного хламидиоза, поражающих дыхательные пути человека. Тест проводится методом ПЦР, позволяющим выявить генетический материал этих микроорганизмов.

Mycoplasma pneumoniae являются бактериями, не имеющими собственной клеточной стенки и паразитирующими в дыхательных путях человека. Они распространяются одинаково успешно больными и бессимптомными носителями и способны вызывать микоплазменную пневмонию (атипичную пневмонию).

Читайте также:  Демодекс: признаки, показания, методика проведения и интерпретация результатов анализа

После двух-трехнедельного инкубационного периода развивается респираторный микоплазмоз в легкой (кашель, насморк и боль в горле) или тяжелой форме (присоединяются ломота в мышцах, повышение температуры, головная боль). Микоплазменная пневмония склонна развиваться у детей и людей со слабым иммунитетом. Антитела, выработанные организмом в процессе выздоровления, обеспечивают временный иммунитет.

Chlamydophila pneumoniae является внутриклеточным паразитом дыхательных путей, передающимся от человека к человеку (опасны люди с симптомами респираторного хламидиоза, и бессимптомные носители бактерии). Способна провоцировать болезни верхних дыхательных путей (синуситы, отиты, фарингиты), бронхиты и атипичную пневмонию, возможно способствует появлению бронхиальной астмы, саркоидоза и атеросклероза.

После заражения начинается инкубационный период, длительность которого точно не установлена (в некоторых случаях с момента инфицирования до первых симптомов могут проходить многие месяцы).

Симптомы обеих респираторных инфекций схожи: кашель, боли в горле, насморк, повышение температуры, лихорадка, симптомы интоксикации. Течение пневмонии при обоих возбудителях также идентично. К развитию пневмонии более склонны дети и люди с ослабленным иммунитетом (пожилые люди, пациенты после трансплантаций или с иммунодефицитами).

Определить какая именно бактерия послужила причиной болезни возможно с помощью лабораторных тестов. В этом случае ПЦР-исследование является наиболее точным и чувствительным методом диагностики.

Показания к исследованию

Данный тест чаще всего назначается терапевтами, инфекционистами, пульмонологами и ЛОРами, при наличии следующих показаний:

  • атипичная пневмония;
  • воспаление легких, сложно поддающееся лечению антибиотиками;
  • сепсис неясной этиологии;
  • рецидивирующие инфекционные заболевания верхних дыхательных путей (в особенности у людей старшего возраста).

Значение результатов

Исследование качественное, потому возможны только два значения:

  • «отрицательно» — возбудителей микоплазменной или хламидийной инфекции не выявлено;
  • «положительно» — возбудители выявлены, пациент болен респираторным микоплазмозом или хламидиозом.

Подготовка к исследованию

Перед взятием соскоба из носа, носо- или ротоглотки, нужно на 3 часа воздержаться от еды, питья, курения и применения медицинских препаратов (спреев, рассасывающихся таблеток, полосканий и пр.).

  • Материал для исследования: соскоб, мокрота.
  • Метод исследования: ПЦР (полимеразная цепная реакция).
  • Сроки проведения: 4 рабочих дня.
  • Запись на анализы

Респираторные микоплазмы и хламидии

Диагностика инфекций, вызванных  Mycoplasma pneumonia.

Возбудителем респираторного микоплазмоза является Mycoplasma pneumoniae — представитель класса Mollicutes, объединяющего бесстеночные, способные к автономному существованию бактерии, по уровню структурной организации занимающие промежуточное положение между бактериями и вирусами.

Респираторный микоплазмоз — распространенное антропогенное заболевание. Особенностью респираторного микоплазмоза является периодичность эпидемий с интервалами, по данным разных источников, варьирующими от 3 до 7 лет.

Распространению инфекции способствует частота и длительность контактов среди лиц, пребывающих в закрытых и полузакрытых коллективах (военнослужащие, школы-интернаты), особенно при их формировании. В 3-10% случаев микоплазменной инфекции рентгенологически диагностируется пневмония.  В 1-5% случаев заболеваний респираторным микоплазмозом требуется госпитализация.

Микоплазменная пневмония сопровождается частым мучительным и продолжительным кашлем со скудной вязкой мокротой, которая плохо эвакуируется, отмечаются боли в грудной клетке, может развиться обструкция бронхов. Диагностика микоплазменной пневмонии только на основании клинических или рентгенологических данных невозможна, поскольку не имеет патогномонических черт.

Основная роль в подтверждении микоплазменной этиологии пневмонии отводится лабораторной этиологической диагностике. Для этиологической диагностики микоплазменной пневмонии применяют: обнаружение ДНК М.

pneumoniae методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени (ПЦР-РВ); выявление антигена микоплазм в реакции прямой иммунофлуоресценции (РИФ); серологические исследования по обнаружению специфических антител класса IgM и IgG к M. pneumoniae в сыворотках крови методом иммуноферментного анализа (ИФА). Mycoplasma pneumoniae относится к трудно культивируемым микроорганизмам.

С целью быстрой этиологической диагностики пневмонии рекомендуется использовать ПЦР при исследовании биологического материала, полученного из нижних дыхательных путей (мокрота при глубоком откашливании, аспираты из трахеи, мокрота, полученная в результате индукции посредством ингаляции гипертонического раствора натрия хлорида, жидкость бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ), получаемая с помощью фибробронхоскопии. При получении положительного результата ПЦР при исследовании биологического материала, полученного из нижних дыхательных путей, этиология пневмонии считается установленной. При невозможности получения биологического материала из нижних дыхательных путей для ПЦР допустимо использовать мазки из верхних дыхательных путей (объединенный мазок из носоглотки и задней стенки глотки), и при получении положительного результата следует считать этиологию пневмонии предположительно установленной.

Диагностика инфекций, вызванных Chlamydophila pneumoniae.

 Chlamydophila pneumoniae- патогенная для человека грамотрицательная бактерия с облигатным внутриклеточным типом паразитирования, обладает тропизмом к клеткам столбчатого цилиндрического эпителия слизистых оболочек человека, в частности, к эпителию бронхиол, бронхов, а также к альвеолярным макрофагам, моноцитам. Для C. pneumoniae-инфекции характерна генерализация процесса, вследствие чего возбудитель может инфицировать эндотелиальные клетки сосудов, синовиальные клетки, гепатоциты и ткани нервной системы.

Читайте также:  Сдать анализ определения коагуляционного фактора VII

С. pneumoniae вызывает пневмонии различной тяжести, длительно протекающие бронхиты, фарингиты, синуситы. Пневмония, вызванная С. pneumoniae обычно имеет благоприятное течение, в редких случаях течение очень тяжелое.

Микст-инфекция, например сочетание с пневмококком или наличие тяжелых сопутствующих заболеваний, особенно у пожилых лиц, осложняет течение заболевания и увеличивает риск летального исхода. Нередко инфекция протекает малосимптомно.

В группу риска попадают все возраста, но частота заболеваемости хламидийной пневмонией выше у детей школьного возраста. Заболеваемость среди мужчин выше, чем среди женщин. Эпидемические вспышки происходят каждые 4-10 лет.

Наиболее специфичным и чувствительным методом выявления возбудителя является ПЦР- диагностика в реальном времени (ПЦР-РВ).

  Высокая чувствительность и отсутствие ложноположительных результатов могут быть обеспечены использованием только лицензированных наборов для эффективного выделения ДНК из клинического материала и наборов для постановки ПЦР современного поколения на основе ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ).

 При получении положительного результата ПЦР при исследовании биологического материала, полученного из нижних дыхательных путей, этиология пневмонии считается установленной.

Однако при пневмониях, вызванных Chlamydophila  pneumoniae, кашель часто бывает непродуктивным, в таких случаях для ПЦР рекомендуется использовать мазки из верхних дыхательных путей (объединенный мазок из носоглотки и задней стенки глотки), и при получении положительного результата следует считать этиологию пневмонии предположительно установленной.

Материалом для проведения ПЦР служат пробы ДНК, полученные из образцов следующего материала: мокроты (либо аспиратов из трахеи), промывных вод бронхов, бронхо-альвеолярного лаважа, мазков со слизистой нижнего носового хода и задней стенки ротоглотки,  секционного материала, цельной крови.

Взятие мазков со слизистой нижнего носового хода

Мазки берут сухим стерильным назофарингеальным велюр-тампоном на пластиковом аппликаторе. Если полость носа заполнена слизью, перед процедурой рекомендуется провести высмаркивание.

Зонд вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2-3 см до нижней раковины.

Затем зонд слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину до носоглотки, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа.

После взятия материала тампон (рабочую часть зонда с тампоном) помещают до места слома в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков. Конец зонда отламывают с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают и маркируют.

Взятие мазков из ротоглотки

Мазки из ротоглотки берут сухими стерильными зондами с вискозными тампонами вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки.

После взятия материала тампон (рабочую часть зонда с вискозным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков. Конец зонда отламывают, придерживая крышкой пробирки с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть пробирку. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают и маркируют.

Допускается хранение клинического материала до проведения исследования в течение 3 суток при температуре от 2 до 8 °С или 1 неделю при температуре не выше минус 16 °С.

Мокрота или аспират из трахеи

Мокроту собирают в стерильные герметичные одноразовые пластиковые контейнеры, после предварительного полоскания полости рта водой. Аспираты из трахеи получают традиционным способом и помещают в стерильные герметичные одноразовые пластиковые контейнеры.

Бронхо-альвеолярный лаваж (БАЛ) или промывные воды бронхов (ПВБ) собирают в одноразовые плотно завинчивающиеся емкости из полипропилена (во избежание адгезии клеток на внутренней поверхности емкости) объемом не менее 5 мл.

Допускается хранение вышеперечисленного материала до проведения исследования в течение 1 суток при температуре от 2 до 8 °С или 1 неделю при температуре не выше минус 16 °С.

Секционный материал помещают в стерильные одноразовые контейнеры и замораживают сразу после взятия либо исследуют в течение 1 ч. Дальнейшее хранение материала возможно в течение года при температуре не выше минус 68 °С. Допускается однократное замораживание-оттаивание материала.

Цельную кровь собирают в пробирки типа Vacuetteâ с раствором или напылением ЭДТА. Закрытую пробирку с материалом несколько раз переворачивают, чтобы перемешать консервант. Для анализа используют цельную кровь, собранную у пациента утром натощак, без предварительной подготовки.

Внимание! Данный материал не используется для диагностики ОРЗ.

Допускается хранение в течение 3 суток при температуре от 2 до 8 °С.

Оставьте комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *