ПЦР крови — диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis)

ПЦР крови - диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis) Туберкулез — инфекционная болезнь, возбудителем которой является микобактерия. Чаще всего поражает дыхательную системы, однако может распространяться и в другие ткани и органы. Наиболее распространенный путь передачи — воздушно-капельный. Для того чтобы развилась активная форма болезни, необходимы благоприятные условия, например, сниженный иммунитет.  ПЦР крови - диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis)

Патология проявляется длительным кашлем, субфебрильной температурой, которая может удерживаться в течении нескольких месяцев, ночным потоотделением, лимфаденопатией. Современные схемы лечения позволяют избавиться от болезни. Однако, для этого необходима своевременная постановка диагноза. Первое время туберкулез может не вызывать клиническую симптоматику, поэтому диагностика должна быть профилактической и регулярной. Ранняя терапия позволяет избавиться от осложнений, среди которых выраженные структурные нарушения дыхательной системы и вторичное распространение инфекции.

Современные методы диагностики туберкулеза

Различают следующие методы диагностики патологии:

  • бактериологический анализ мочи;
  • общий анализ мочи;
  • биохимическое исследование крови;
  • T-SPOT.TB;
  • микробиологические методы диагностики;
  • исследование свертывающей системы;
  • микроскопический анализ мокроты;
  • лучевые методы диагностики.

Перейти к анализам

Рассмотрим эти методы подробнее.

Бактериологический анализ мочи

Показан при внелегочной форме туберкулеза. Этот метод диагностики крайне важен, ведь туберкулез мочеполовой системы часто вызывает осложнения и долгое время не вызывает симптомов.

Именно туберкулез может долго маскироваться под воспалительный процесс или мочекаменную болезнь. Поэтому, длительная патология данных органов, которая сложно поддается лечению, является показанием к диагностике.

Также, анализ мочи показан при туберкулезе для исключения вовлечения в процесс мочеполовой системы.

Для того, чтобы определить наличие возбудителя в моче, проводится бактериоскопия или посев на среду.

Для обнаружения микобактерии проводится специальное окрашивание, при котором возбудитель приобретает другой оттенок, отличный от здоровых клеток.

Другой метод заключается в посеве образца мочи на питательную среду. Если наблюдается рост культуры микобактерий, это говорит о наличии в организме возбудителя.

Общий анализ мочи

В общем анализе мочи наблюдаются характерные изменения при туберкулезе. Это появление капель гноя, наличие или следы белка и более кислая реакция. Также появляются видоизмененные лейкоциты, бактерии, эритроциты.

Биохимический анализ крови

На некоторых стадиях болезни выявляются изменения в биохимическом исследовании крови. При неактивной форме никаких изменений в данных анализах нет, хотя они могут появляться при сопутствующей патологии.

Острая форма туберкулеза приводит к снижению альбумино-глобулинового коэффициента. Если патология привела к осложнениям в виде поражения печени, повышается уровень трансаминаз, разных фракций билирубина. Эти показатели входят в обязательное обследование пациента с туберкулезом. Пациент сдает этот анализ в динамике, для оценки состояния.

Ухудшение работы почек может отражаться в повышении креатинина, изменениях скорости клубочковой фильтрации.

Биохимический анализ крови не имеет специфической диагностической ценности, однако является важным компонентом оценки качества лечения и состояния пациента.

ПЦР крови - диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis)

К иммунологическим методам диагностики относится методика T-SPOT.TB.  Основа способа заключается в изучении реакции Т-лимфоцитов. Процедура имеет высокую чувствительность и довольно информативен.

Ложные результаты исключены даже тогда, когда остальные методики нечувствительны к результату. Метод применяется в сомнительных случаях, например после прививок, у пациентов с аутоиммунной патологией, у медработников.

Данный способ позволяет оценить наличие возбудителя количественно, но не дает информации о фазе процесса.

Особое место данная диагностика занимает у носителей ВИЧ. Дело в том, что вирус поражает именно лимфоциты. Несмотря на это диагностика по методу T-SPOT.TB дает точные результаты.

Высокая точность теста объясняется также тем, что тест-система чувствительна к компонентам возбудителя, но именно к тем, которых нет ни в вакцине БЦЖ, ни в других микроорганизмах, которые имеют сходные компоненты.

Суть метода заключается в количественном определении в крови эффекторных Т-клеток (CD4 и CD8), вырабатывающих ИФН-ɣ (гамма-интерферон), который продуцируется в ответ на стимуляцию специально подобранными антигенами ESAT-6 и CFP10. Речь идет об одном из фрагментов генома микобактерии.

Примечательно, что высокая специфичность наблюдается и в латентную, и в активную фазу.

Особенной подготовки к сдаче анализов не требуется — достаточно ограничить прием пищи за два часа до процедуры. Проводится забор венозной крови. Это необходимо проводить в соответствующих условиях, с соблюдением правил асептики и антисептики.

Положительный результат теста говорит о том, что в организме присутствует микобактерия, а отрицательный — об обратном.

ПЦР крови - диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis)

Микробиологические методы диагностики

Применяются для прямого обнаружения возбудителя туберкулеза в биологических тканях организма. Применяются различные методики.

Окраска по Цилю-Нельсену заключается в том, что мазок с препаратом обрабатывается специфическим красителем.

Микобактерии приобретают характерный оттенок, что говорит о том, что реакция произошла. Так можно подтвердить или исключить наличие возбудителя в материале. Метод экономичный и сравнительно быстрый.

Однако, он чувствителен только при высокой концентрации микроорганизмов в образце.

Люминесцентная микроскопия дает более высокое разрешение и улучшает методику окраски. Требуется применение флуорохромов — специфических веществ, которые “подсвечивают” микобактерии и делают их более видимыми под микроскопом.

Полимеразно-цепная реакция позволяет осуществить воспроизведение ДНК бактерии из её фрагментов, которые содержатся в тканях. Это быстрый и информативный метод диагностики, который имеет высокую специфичность и чувствительность.

Культуральный метод заключается в выращивании культуры из микобактерий. Для этого берется фрагмент биоматериала и сеется на питательную среду.

Потом оценивается штамм, который вырос на среде и подтверждается или исключается диагноз. Используется специфическая среда, на которой с большей вероятностью вырастет необходимая среда.

Выращенные колонии можно использовать для определения чувствительности к антибиотикам.

ВАСТЕС460 — это современный метод диагностики, в ходе которого используется радиометрическая система и меченый СО2. Бактерия поглощает элемент-индикатор и её можно обнаружить в исследуемом материале.

Исследование свертывающей системы крови

Коагулограмма часто используется в фтизиатрии, так как у пациентов с туберкулезом постепенно возникает кровохаркание или легочные кровотечения. Это приводит к изменению показателей гемостаза. Анализ может меняться и после хирургического лечения болезни.

ПЦР крови - диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis)

Контроль коагулограммы основан на анализе таких показателей, как АЧТВ, фибриноген, время кровотечения, время свертывания. Эти показатели могут колебаться в разные стороны, в зависимости от объема кровопотери.

Если она незначительна — коагуляционная система стимулируется и показатели повышаются. Потеря большого объема крови приводит к снижению в организме факторов свертывания и соответствующим изменениям коагулограммы.

Микроскопический анализ мокроты

Анализ мокроты — обязательное исследование при туберкулезе. При этой патологии мокроты выделяется в небольшом количестве, имеет вкрапления крови, гноя, слизи. На ранних стадиях, кровь может не появляться.

Кавернозная форма болезни приводит к появлению в материале так называемых рисовых телец. Также, наблюдаются вкрапления кристаллов, эластичных волокон, холестерина. Повышается белок в общем составе мокроты.

Если произошел распад — мокрота содержит кальций, волокна различного происхождения, холестерин и, собственно, туберкулезные микобактерии.

Проводится также бактериология мокроты. Применяется специфический метод окраски, который позволяет определить наличие микобактерии. Посевы на питательные среды также имеют диагностическую ценность.

Бактериоскопия мокроты подразумевает её изучение под необходимым увеличением микроскопа. При высокой концентрации микроорганизмов методика довольно специфична и чувствительна. Мокрота изучается 3 раза для того, чтобы получить наиболее точный результат.

Лучевые методы диагностики

Лучевые методы позволяют визуализировать изменения в организме, к которым привела микобактерия. Это и скрининговый метод диагностики, и способ оценки тяжести и степени патологии. Также, лучевая диагностика — метод динамической оценки пациента. Различают такие лучевые методики в диагностике туберкулеза:

  • флюорография;
  • рентгенография;
  • томография;
  • рентгеноконтрастные исследования.

Флюорография используется для скрининговой диагностики, которая требует подтверждения при подозрительных результатах. Неспецифический метод, который используется для профилактического осмотра. Цифровая методика позволяет оценивать изображение на экране с использованием увеличения и приближения картинки. Метод прост, быстрый и экономичный.

Рентгенография является более точной методикой и позволяет полноценно обследовать структуры грудной клетки.

на снимке можно обнаружить признаки функциональной недостаточности различных органов, проследить топография новообразования, диагностировать каверну, ателектаз, абсцесс или нарушение целостности плевральной полости.

Выполняется в двух проекциях для более точных результатов. Иногда используется прицельное проведение диагностики.

Томография является наиболее точной методикой визуализации структур грудной клетки. Это формирование послойных изображений органов и структур. Можно определить распространение и локализацию очага болезни, увидеть, какие ткани он поразил и насколько глубоко проник.

ПЦР крови - диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis)

Методики с использованием контраста применяются для получения изображения бронхиального дерева (бронхография). Можно обнаружить полостные изменения, нарушения дренажной функции, структурные изменения и наличие фистул. также применяется ангиопульмонография. контраст вводится в сосудистое русло и позволяет оценить легочной кровоток. особенно это важно при кровохарканьи и кровотечениях.

Применяются радионуклидные методы, сцинтиграфия. Они применяются для оценки функциональной активности или нарушений.

Читайте также:  Анализ выявления аллергии на пыльцу амброзии

Ультразвуковая методика применяется для оценки деятельности сердца, диагностики состояния плевральных синусов, лимфатических узлов.

Сбор материала и подготовка к исследованиям

Для анализа мочи на туберкулез применяется утренняя порция. необходимо провести туалет наружных половых органов и не касаться ими резервуара для сбора материала. Контейнер должен быть стерильным и сухим. Собранный биоматериал необходимо как можно скорее доставить в лабораторию, не допускать его высыхания и нагревания.

За сутки до сдачи анализа необходимо отказаться от таких продуктов, как черника, морковь, свекла и других ярких овощей и фруктов. Также следует ограничить прием диуретиков, витаминов, ацетилсалициловой кислоты. Женщинам следует помнить, что анализы мочи не сдают во время менструаций. Сдается средняя, промежуточная порция мочи.

Сдача крови происходит натощак, так как прием пищи может исказить результаты исследования. Стоит проконсультироваться с лечащим врачом на предмет отмены некоторых препаратов.

Накануне не следует употреьоять кофе, алкоголь, табак. Сбор крови происходит в стерильных условиях, с соблюдением правил забора материала.

Для некоторых исследований необходима капиллярная, а для некоторых — венозная кровь.

Мокрота собирается натощак, с соблюдением основных правил. Материал необходимо откашлять, чтобы в посуду не попала слизь изо рта или носоглотки. Используется специальная плевательница из темного стекла, с плотной крышкой. Мокрота не должна обветриваться или высыхать.

К инструментальным методам исследования не требуется особая подготовка. Исключение — применение контрастного вещества. Перед его использованием необходимо оценить функцию почек. Большинство рентгеноконтрастных веществ выводится именно эти органом и врач должен быть уверен в том, что выделительная система выдержит эту нагрузку.

Нормы и выявляемые отклонения

В норме, в организме не должно быть микобактерий. Их наличие расценивается как положительный результат диагностики туберкулеза. Негативный результат говорит о том, что у пациента нет данной патологии.

Некоторые методы неспецифичны и не обладают высокой диагностической ценностью. Они используются для оценки общего состояния. Бактериологические методики более специфичны и их положительные результаты можно считать подтверждением диагноза.

Отрицательный результат является поводом для повторных анализов, если есть клинические признаки болезни.

Сроки готовности результатов диагностики туберкулеза

ПЦР крови - диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis)

Общий и биохимический анализ крови, мокроты и мочи может быть готов в течении нескольких часов. Как правило, результаты сообщаются на следующий день.

Бактериологический метод с окраской занимает около 24 часов.

Посевы занимают больше времени — до нескольких недель.

Результат лучевых методов диагностики зависит от скорости описания снимка. Чаще всего, это занимает около суток.

Квантифероновый тест. Сравнение квантиферонового теста и Т-Спот. ПЦР-диагностика туберкулеза

  • Стоимость квантиферонового теста: 4 600 руб.
  • Стоимость т-спот: 5 600 руб.

Квантифероновый тест (QuantiFERON®-ТВ Gold) — это современный лабораторный тест, который позволяет выявить туберкулез в латентной (скрытой) и активной стадии.

* принимаем анализ ежедневно по предварительной записи

ПЦР крови - диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis)

Туберкулез – опасное инфекционное заболевание, вызванное микобактериями туберкулеза. Микобактерии туберкулеза могут поражать все органы и системы организма, чаще страдают органы дыхания, поэтому выделяют две формы туберкулеза: лёгочная и внелёгочная.

При лёгочной форме поражаются лёгкие и бронхи, при внелёгочной форме: пищеварительная система (чаще дистальный отдел тонкого кишечника и слепая кишка); мочеполовая система (почки, мочевыводящие пути, половые органы у женщин: матка, трубы, придатки, у мужчин: простата, яички); нервная система (головной, спинной мозг); опорно-двигательная система (кости, чаще поражается позвоночник, суставы); кожа, глаза и др.

Основной путь передачи бактерии туберкулеза, является воздушно-капельный, который осуществляется при разговоре, кашле или чихании больного человека, именно этот путь заражения приводит к лёгочной форме туберкулеза.

Чаще всего после инфицирования заболевание протекает латентно (скрыто), и лишь у некоторых, при определенных изменениях в организме переходит в активную стадию.

Своевременная диагностика туберкулеза — это единственная возможность не допустить перехода латентной стадии заболевания в активную у инфицированных людей, и защитить здоровых людей от инфицирования, путем выявления зараженных.

Разберем по полочкам скрининговые специфические методы диагностики туберкулеза: на сегодняшний день существует 2 группы.

  • 1 группа — это кожные тесты, сюда относится проба Манту и Диаскин тест.
  • 2 группа — это IGRA-тесты, лабораторные исследования туберкулеза по крови человека, к ним относятся ТОЛЬКО: Квантифероновый тест  и T-SPOT.TB (т-спот).

ОБРАТИТЕ ВНИМАНИЕ! ПЦР диагностика туберкулеза не подходит для скрининга выявления туберкулеза, т.к. для этого метода необходим материал из ОЧАГА предполагаемого туберкулеза.

ПЦР крови на микобактерию туберкулеза, будет положительна при  туберкулезном сепсисе (заражение крови) и диссеминированном туберкулезе (самые тяжелые формы туберкулеза). В остальных случаях результат будет отрицательный, но это не означает, что человек не инфицирован туберкулезом.

ПЦР диагностика используется для быстрой диагностики открытых и закрытых форм туберкулеза, например у человека выставлен диагноз туберкулез легких, необходимо понять, опасен он для окружающих или нет, берется мокрота и определяется возбудитель в мокроте.

ПЦР положительная (рис.2) —  туберкулезная палочка выделяется при чихании, кашле, разговоре, зараженный человек представляет опасность для окружающих. ПЦР отрицательная (рис.1) — туберкулезный очаг не сообщается с бронхом, человек не выделяет туберкулезную палочку в окружающую среду, но при этом он заражен туберкулезом и нуждается в лечении!

Поэтому данный метод не используется для скрининговой диагностики туберкулеза, т.к. он не может исключить или подтвердить факт инфицирования туберкулезом.

ПЦР крови - диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis)

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ТАБЛИЦА СКРИНИНГОВЫХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА

Реакция Манту Диаскин тест Квантифероновый тест T-SPOT.TB
Метод исследования Кожный тест Кожный тест Анализ крови из вены Анализ крови из вены
Побочные реакции Возможны Возможны Нет Нет
Противопоказания Есть Есть Нет Нет
Оценка результата Субъективная Субъективная Объективная объективная
Ложноположительный результат после  БЦЖ Часто Отсутствует Отсутствует Отсутствует
Выявляет стадию туберкулеза Активную Активную Латентную и активную Латентную и активную
Использование при беременности Запрещено Запрещено Разрешено Разрешено
Использование при острых заболеваниях Запрещено Запрещено Разрешено, но не рекомендуется, оптимально через 1 мес после выздоровления Разрешено, но не рекомендуется, оптимально через 1 мес после выздоровления
Во время карантина Запрещено Запрещено Разрешено Разрешено
Цена Бесплатно в поликлинике Бесплатно в поликлинике 4950 рублей 5990 рублей

СРАВНЕНИЕ КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА И Т-СПОТ

Квантифероновый тест, также как и T-SPOT относится к IGRA-тестам (interferongammareleaseassay), главное различие в том, что квантифероновый тест определяет гамма-интерферон из сенсибилизированных  Т-лимфоцитов, а Т-СПОТ определяет сами сенсибилизированные Т-лимфоциты, которые вырабатывают гамма-интерферон на рекомбинантные протеины  ESAT-6 и CFP-10, в крови у инфицированного микобактериями туберкулеза человека.

Диагностический тест T-SPOT.TB Квантифероновый тест
Срок исполнения 1-2 рабочих дня 1-3 рабочих дня
Методика исследования основана на стимуляции Т-клеток пептидами ESAT-6 и CFP-10 антигенов Ложноположительные результаты на БЦЖ-вакцинацию отсутствуют Ложноположительные результаты на БЦЖ-вакцинацию отсутствуют
Оценка результата Определяется количество сенсибилизированных Т-лимфоцитов, выделяющих  гамма-интерферон на ESAT-6 и CFP-10 антигены Определяется сам гамма-интерферон из сенсибилизированных Т-лимфоцитов на стимуляцию пептидными антигенами ESAT-6 и CFP-10
Стандартизация по количеству лимфоцитов Есть Нет
Дифференциация между латентной и активной стадией туберкулеза Нет Нет
Влияние принимаемых лекарственных препаратов на тест Нет Есть
Точность при иммуносупрессии (в т.ч. ВИЧ) Высокая Высокая, но могут быть ложноотрицательные результаты при выраженном снижении лимфоцитов
Чувствительность теста от возраста пациента Практически не изменяется Снижается после 30 лет
Применение у детей Ограничений нет Рекомендован с  5 лет
Материал для исследования Венозная кровь Венозная кровь
Подготовка к исследованию Не требуется. Взятие крови проводится натощак или не ранее, чем через 4 часа после необильного приема пищи. Допустимо пить чистую неминеральную и негазированную воду. Чай, кофе, сок запрещаются. Не требуется. Взятие крови проводится натощак или не ранее, чем через 4 часа после необильного приема пищи. Допустимо пить чистую неминеральную и негазированную воду. Чай, кофе, сок запрещаются.

ПРИНЦИП КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:

ПЦР крови - диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis)

ПОКАЗАНИЯ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ:

ПЦР крови - диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis)

  1. Профилактическое обследование детей с 5 лет, посещающие детские сады и учебные учреждения.
  2. В случае противопоказания проведения кожных тестов: аллергические заболевания, кожные заболевания, эпилепсия, острые заболевания и обострение хронических;
  3. В случае токсико-аллергических реакций на туберкулин, который входит в пробу Манту;
  4. У детей, привитых БЦЖ, у которых выявлена ложноположительная реакция Манту;
  5. У людей, посетивших страны с высоким уровнем заболеваемости туберкулёзом (Африка, Азия);
  6. Обследование беременных в случае контакта с больным туберкулёзом или наличия симптомов;
  7. У лиц, контактирующих с туберкулёзными больными;
  8. У пациентов на ФНО-ɣ терапии;
  9. У ВИЧ-инфицированных;
  10. При подозрении на внелёгочные формы туберкулёза.

КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ является альтернативой пробе Манту, согласно клиническим рекомендациям, утвержденным Российским обществом фтизиатров и Министерством здравоохранения РФ, «Выявление и диагностика туберкулеза у детей, поступающих и обучающихся в образовательных организациях» (Москва, 2017 г.; стр. 14) 

Читайте также:  Общий иммуноглобулин M: норма и отклонения

КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЕЙ ЗАМЕНИТЬ НА T-SPOT.TB, ЕСЛИ:

  1. пациент принимает препараты угнетающие выработку гамма-интерферона (глюкокортикоиды);
  2. пациент принимает препараты снижающие уровень лейкоцитов: группа НПВС (аспирин, парацетамол, найс, кеторол и др.), цитостатики и т. д.;
  3. пациент с выраженным иммунодефицитом связанным со снижение уровня лимфоцитов, в том числе ВИЧ-инфекция;
  4. пациент до 5 лет и в пожилом возраст;

так как это позволит избежать ложноотрицательных результатов, тем самым не даст пропустить заражение туберкулезом. Во всех остальных случаях Квантифероновый тест не уступает T-SPOT.TB и дает такую же надежность и информативность.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА

Положительный Сомнительный/
Неопределенный
Отрицательный
  • Инфицирование микобактериями туберкулеза
  • Инфицирование нетуберкулезными микобактериями (M. kansasii, M. szulgai, M. Marinum)

!!! необходима консультация фтизиатра!!!

Сомнительный результат,  требует контрольного исследования через 4-8 недель, может отражать начальный этап заражения
Неопределенный результат связан с недостаточной функциональной активностью Т-лимфоцитов. Рекомендовано повторить исследование через 2-4 недели.
  • Отсутствует заражение микобактерией туберкулеза
ЛОЖНООТРИЦАТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ :

  • недавнее инфицирование;
  • пациент до 5 лет, либо пожилой;
  • выраженный иммунодефицит;
  • прием лекарственных препаратов снижающих уровень лейкоцитов и/или блокирующий выработку гамма-интерферона.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах защиты здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.

Шушакова Екатерина Константиновна

ПРИМЕРЫ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ:

Анализ крови на туберкулез

  • Полное название анализа: Анализ крови на туберкулез (Tuberculosis)
  • Биоматериал: Соскоб: из церв. канала,из уретры, из влагалища, секрет простаты, соскоб с эрозивно-язвенных элементов, поверхность миндалин, мазок из носоглотки и ротоглотки, отделяемое конъюнктивы, мокрота, моча, слюна, сперма
  • Время выполнения: 2-3 дня

Туберкулез относится к заболеваниям, которые способны привести к смерти пациента.

Возбудитель опасен не только для больного, но и для окружающих его людей, так как заражение происходит воздушно—капельным путем. Поэтому на первое место выходят все способы диагностики данной патологии, так как на начальных стадиях бороться с болезнью намного легче, чем с запущенными процессами.

ПЦР крови - диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis)

Туберкулиновая проба не всегда отражает истинное положение дел. В некоторых случаях проводить пробы нельзя по медицинским показаниям. Анализ на туберкулез проводится в двух случаях: для выявления возбудителя и оценки эффективности проводимого лечения.

При инфицировании туберкулезом, в большинстве случаев возникает латентная (неактивная) форма инфекционного заболевания. Хотя и при таком состоянии в редких случаях вероятно проявление таких симптомов как вялость, недомогание, быстрая утомляемость, бледность кожных покровов, худоба, потение, субфебрильная температура и т. д. Возможны заболевания крови – анемия и лейкопения.

Любая форма туберкулеза – это высоко заразительная инфекция, так как патоген присутствует в слюне, мокроте, крови, моче и других биоматериалах зараженного человека. Болезнь несет в себе угрозу будущему нации, по этой причине открываются все новые методы достоверного выявления бактерии.

Используется классический культуральный метод, анализ мазка (изучается мокрота человека), ИФО и ПЦР-метод.

Последний тип исследования позволяет обнаружить ДНК инфекции даже во фрагментах единичных клеток и полностью исключает вероятность перекрестной реакции, дифференцировать диссеминированные и ограниченные формы туберкулеза.

Аналитические показатели:

  • определяемый фрагмент — специфичные участки ДНК микобактерий;
  • специфичность определения — 100%;
  • чувствительность определения — 100 копий ДНК микобактерий в образце.

Что показывает анализ

При подозрении на туберкулез назначается сразу несколько методик исследования плазмы к которым относят:

  • Биохимический анализ;
  • Квантифероновый тест;
  • Иммуноферментный или ИФА;
  • Полимеразная цепная реакция.

Каждый из перечисленных методов имеет свою цель, но в комплексе они помогают выявить туберкулез в начальной и латентной форме, протекающей без ярко выраженных, характерных для туберкулеза симптомов. Сделать это используя лишь один вид обследования невозможно.

Общий анализ не способен обнаружить палочку Коха, его задача выявить наличие воспалительного процесса в организме. Для врача в данном случае важен показатель СОЭ, лимфоцитов, лейкоцитов и нейтрофилов.

Биохимию имеет смысл проводить в период обострения. Квантифероновый тест необходим для определения в плазме антител к микобактериям туберкулеза. Недостатком данного метод является невозможность определить стадию болезни: острую или ремиссию.

Показания к анализу

Анализ крови на туберкулез проводится в следующих случаях:

  • После положительной реакции пробы;
  • После контакта с больным туберкулезом;
  • Для диагностики туберкулёза, локализованного не в легких, а других органах и системах;

Анализ крови назначают при наличии следующих симптомов:

  • Кашель неизвестного происхождения, продолжающийся более трех недель;
  • Наличие субфебрильной температуры в течение длительного времени;
  • Появления сильной слабости, приводящей к потере трудоспособности;
  • Сильной потере веса, не связанной с диетами и ограничениями в питании;
  • Появления румянца на фоне сильной бледности кожных покровов;
  • Увеличение лимфоузлов;
  • Заострение черт лица.

Забор крови для проверки на туберкулез проводят пациентам, страдающим сахарным диабетом, имеющим статус ВИЧ больных и тем, кому проводилась пересадка органов.

Подготовка к процедуре

Чтобы получить точный результат анализа, рекомендуется соблюдать ряд правил:

  • Забор крови проводится строго натощак, есть можно за 8 часов до сдачи материала. Накануне забора материала исключается прием жирных и острых блюд;
  • За несколько дней до анализа запрещено употреблять алкоголь;
  • Ограничение вводится на физические нагрузки.

За неделю до анализа прекращают прием антибиотиков и противомикробных средств. Если пациент принимал какие—либо лекарства, об этом следует сообщить лаборанту и лечащему врачу, так как некоторые препараты могут искажать результат.

Ложный результат будет получен в том случае, если перед анализом проводилась прививка БЦЖ или выполнялась туберкулиновая проба. Квантифероновый тест можно проводить и после прививки, в этом случае введенный препарат никак не влияет на показатели.

Как проводится анализ

ПЦР крови - диагностика туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis)

При проведении квантиферонового теста, в крови пытаются обнаружить специфические интерфероны, которые появляются только в случае присутствия в организме палочки Коха. Данный метод заключается в том, что в плазму добавляются антигены. Потом наблюдают за реакцией, происходящей в плазме.

Иммуноферментный метод считается более точным. В этом случае ищут определенные иммуноглобулины, которые вырабатываются при инфицировании палочкой. Но в этом случае реакция может быть запущена не только возбудителем туберкулеза. В данном случае этот тип обследования проводят для определения эффективности лечения.

Полимеразная цепная реакция является при сегодняшнем уровне развития медицины одним из самых точных способов выявления заболевания. Так как стоимость теста достаточно высока, его назначают в случае неясной клинической картины и имеющихся сомнений в диагнозе.

При этом методе обследования в плазме крови определяют наличие частей молекулы ДНК. На первом этапе в плазме определяют наличие палочки Коха. Затем переключаются на генный уровень. В этом случае удается обнаружить ненормальное количество бактерий. Данное обследование позволяет определить и место локализации микроорганизмов. Среди всех сред плазма является наиболее информативный.

Нормы и расшифровка результата

Если в ходе ПЦР выявлен:

  • Отрицательный результат, то подозрение на туберкулез полностью не снимается. Пациент должен будет ещё раз пройти обследование и подтвердить отрицательное значение;
  • Если обнаруживаются части генного кода и следы жизнедеятельности бактерий, говорят о положительном результате.

Иммуноферментный анализ также имеет два варианта ответа — положительный и отрицательный. Наличие иммуноглобулина amg свидетельствует о ходе острого процесса из—за инфицирования. При отрицательном значении данные структуры в плазме полностью отсутствуют.

При общем анализе повышается скорость оседания эритроцитов и достигает 50 единиц. Повышается концентрация лейкоцитов и эозинофилов. Число лимфоцитов снижается. При ремиссии число форменных элементов соответствует принятым нормам, но уменьшается уровень гемоглобина. При значительном количестве инфильтратов уменьшаются размеры красных кровяных телец и снижается их количество.

В биохимии изменяется альбумин—глобулиновый коэффициент. Он уменьшается, хотя его норма 1,5—2,3). В стадии ремиссии основные показатели остаются в пределах нормы.

Данная статья размещена исключительно с целью ознакомления в познавательных целях и не является научным материалом или профессиональным медицинским советом. За диагностикой и лечением обратитесь к врачу.

Mycobacterium tuberculosis, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Исследование для выявления возбудителя туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) микобактерии в образце биоматериала.

  • Венозная кровь 
  • Клетки эндометрия матки 
  • Мазок урогенитальный 
  • Мазок урогенитальный (с секретом простаты)
  • Первая порция утренней мочи 
  • 2 суток
  • Туберкулез, микобактерии туберкулеза, палочка Коха.
  • Tuberculosis, Tubercle bacillus, Koch's bacillus.
  • Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
  • Венозную кровь, биоптат, клетки эндометрия матки, ликвор, мазок урогенитальный (с секретом предстательной железы), мокроту, плевральную жидкость, первую порцию утренней мочи, эякулят.
  • Подготовки не требуется.

Туберкулез (от лат. tuberculum – «бугорок») – инфекционное заболевание человека и животных, передающееся преимущественно воздушно-капельным путем.

Риск заразиться повышает подавление иммунитета, вызванное ВИЧ/СПИДом, диабетом, заболеванием почек, трансплантацией органов и применением иммуносупрессоров, беременностью, старением. Кроме того, наиболее подвержены ему те, кто контактирует с больными туберкулезом, а также дети до 5 лет после виража туберкулиновой пробы.

К наиболее уязвимым группам населения относят бездомных, заключенных, мигрантов из стран с высокой заболеваемостью туберкулезом, наркопотребителей, а также пожилых людей.

Для данного исследования используется тест-система, основанная на выявлении геномной ДНК возбудителя туберкулеза с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени (реал-тайм ПЦР). В современной диагностике это один из самых быстрых, универсальных и высокочувствительных методов.

Стандартные способы обнаружения микобактерий туберкулеза базируются на выращивании патогенных микроорганизмов в питательной среде. Сложности связаны с низкой скоростью роста колоний Mycobacterium tuberculosis – необходимо ожидать до 1,5 месяцев после взятия материала.

Высокой чувствительностью и специфичностью обладают молекулярно-биологические методы, основанные на детекции генетического материала микобактерий туберкулеза. Их важнейшим преимуществом является высокая скорость получения результата. Использование ПЦР реал-тайм позволяет выявить возбудитель туберкулеза уже в день получения клинического образца.

Бактериемия (попадание в кровь пациента микобактерий) может возникать на ранних стадиях туберкулезной инфекции, а также при развитии генерализованного или внелегочного туберкулеза.

Она опасна тем, что иммунный ответ на бактерии вызовет сепсис и септический шок, чреватый смертью.

Риск развития генерализованного туберкулеза наиболее высок у пациентов с ВИЧ на поздних стадиях, у тех, кто прервал противотуберкулезную терапию, а также у не обратившихся вовремя за медицинской помощью при появлении симптомов туберкулеза.

Диагностика туберкулеза у ВИЧ-инфицированных затруднена из-за иммуносупрессированного состояния организма, что зачастую проявляется в ложноотрицательных результатах туберкулиновых реакций и микробиологических тестов. В связи с этим тестирование на Mycobacterium tuberculosis методом ПЦР реал-тайм имеет большое значение.

Для диагностики туберкулеза легких (в частности, его генерализованных и внелегочных, связанных с бактериемией, форм), и контроля за его лечением.

  • При подозрении на внелегочный туберкулез.
  • При симптомах бактериемии на фоне туберкулезной инфекции: повышенной температуре тела, потливости и пр. (при небольшом количестве бактерий в крови бактериемия может протекать бессимптомно).
  • Если у пациента был длительный контакт с больным туберкулезом.
  • При ненормальной реакции на туберкулиновую пробу у детей.
  • Когда у пациента ВИЧ-инфекция.

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат

  • Наличие возбудителя в исследуемом биоматериале. Это обычно встречается при активной форме туберкулеза, требующей лечения. Выявление большого количества микобактерий чаще всего указывает на внелегочную форму туберкулеза либо генерализацию инфекции.

Отрицательный результат

  • Возбудителя туберкулеза не выявлено. Бактериемия отсутствует.
  1. Эффективная противотуберкулезная терапия со временем приводит к исчезновению микобактерий в клиническом материале.
  2. Для назначения корректной схемы лечения при выявлении у пациента туберкулеза необходимо провести тест на чувствительность микобактерий к противотуберкулезным препаратам.
  3. Врач общей практики, терапевт, фтизиатр, уролог, гинеколог, инфекционист.
Тип На дому В Центре Самостоятельно
Биоптат да
Венозная кровь да да
Клетки эндометрия матки да да
Ликвор да
Мазок урогенитальный да
Мазок урогенитальный (с секретом предстательной железы) да
Мокрота да
Плевральная жидкость да да
Первая порция утренней мочи да
Эякулят да

На дому: возможно взятие биоматериала сотрудником мобильной службы.

В Диагностическом центре: взятие, либо самостоятельный сбор биоматериала осуществляется в Диагностическом центре.

Самостоятельно: сбор биоматериала осуществляется самим пациентом (моча, кал, мокрота и т.п.). Другой вариант – образцы биоматериала предоставляет пациенту врач (например, операционный материал, ликвор, биоптаты и т.п.). После получения образцов пациент может как самостоятельно доставить их в Диагностический центр, так и вызвать мобильную службу на дом для передачи их в лабораторию.

Туберкулез (Mycobacterium tuberculosis) (суммарные антитела)

Антитела к возбудителю туберкулеза (M. tuberculosis) – это специфические иммуноглобулины, вырабатываемые иммунной системой в ответ на инфицирование возбудителем туберкулеза.Туберкулез – это инфекционное заболевание, возбудителями которого являются аэробные микобактерии (M. tuberculosis, M. bovis, M. africanus, M.

microti), распространенные в почве, воде и у животных. Mycobacterium tuberculosis – это вид микобактерий, который вызывает туберкулез у человека в 92 % случаев. M. tuberculosis передается воздушно-капельным путем от больных туберкулезом в активной форме.

У 90 % людей после первичного инфицирования микобактерии оседают в нижних отделах легких и не приводят к развитию заболевания, так как вырабатывается иммунный ответ, не допускающий увеличения количества бактерий. Однако в случае сильного ослабления иммунной системы туберкулезные палочки начинают активно размножаться и туберкулез переходит из латентной формы в активную.

Возможно поражение легких, костей, суставов, мочеполовых органов, лимфатической системы, кожи, глаз и нервной системы. Микроскопическое исследование возбудителя в посеве мокроты по-прежнему считается «золотым стандартом» в диагностике туберкулеза. Однако данный метод имеет как свои достоинства (высокая специфичность), так и недостатки (низкая чувствительность, т. к.

необходима определенная концентрация бактерий в образце). Эффективность метода ниже в отношении специфических категорий лиц (ВИЧ-инфицированных, людей старше 60 лет и детей, у которых к тому же существуют сложности со сбором мокроты). Кроме того, данное исследование занимает продолжительное время, т. к. для роста бактерий требуется 6-8 недель.

Наряду с бактериологическим методом широко распространено рентгенологическое исследование. Оба метода применимы только к легочным формам туберкулеза. С другой стороны, при помощи метода туберкулиновой пробы практически невозможно дифференцировать латентную и активную формы туберкулеза.

Дифференциальная скрининговая диагностика активного туберкулеза возможна при помощи определения специфических антител к М. tuberculosis методом иммуноферментного анализа. На активной стадии туберкулеза начинается интенсивная выработка IgG и IgM антител к специфическим антигенам, которые могут быть выявлены в сыворотке крови уже через месяц с начала активизации микобактерий.

Высокая специфичность теста достигается использованием специфических для M. tuberculosis антигенов, что исключает ложноположительные результаты у вакцинированных и инфицированных другими микобактериями лиц. Чувствительность данной тест-системы составляет от 61 % (туберкулез лимфатических узлов) до 100 % (туберкулезный экссудативный плеврит) в зависимости от локализации инфекции; специфичность – 95 %.

Используется анализ:

  • Для выявления активного туберкулеза, в особенности внелегочных форм.
  • Для мониторинга эффективности лечения туберкулеза.
  • Для выявления инфицированных лиц.
  • Для подтверждения диагноза (наряду с использованием дополнительных диагностических исследований).

Назначается анализ:

  • Когда известно, что пациент имел длительный контакт с больными туберкулезом или что его работа связана с постоянным контактом с людьми из групп риска (бездомными, инъекционными наркопотребителями, лицами, находившимися в местах лишения свободы).
  • При соответствующих симптомах: слабости, быстрой утомляемости, субфебрильной температуре тела, ночной потливости, персистирующем кашле в течение 2-3 недель, боли в грудной клетке (легочном туберкулезе), хронических болях в спине, суставах, брюшной области с невыясненной этиологией.
  • При длительном безрезультатном лечении хронического простатита, цистита, пиелонефритов и при воспалении эндометрия (туберкулезе мочеполовых органов).
  • При анемии, лейкоцитозе.

Этот тест особенно важен, когда при отрицательном результате рентгенологического исследования, микроскопии и методе ПЦР есть симптомы неясного происхождения, схожие с проявлениями туберкулеза внелегочных форм.

Положительный результат – недостаточное основание для постановки диагноза «активный туберкулез», так как данный анализ должен сопровождаться другими диагностическими тестами (микроскопией бактериальных культур, ПЦР) в соответствии с клинической картиной и предполагаемыми очагами локализации инфекции для более углубленного обследования.

На ранней стадии инфекции тест может дать отрицательный результат из-за того, что еще не выработалось достаточное количество антител. В таких случаях при симптомах инфекции рекомендуется повторить исследование через 2-7 недель или провести другие виды тестирования. Тест нечувствителен к БЦЖ-вакцинации, так какв нем задействованы антигены, специфичные для M. Tuberculosis и нехарактерные для M.

Bovis. Возможность ложноположительных результатов данного анализа исключена в связи с отсутствием взаимовлияния с другими видами микобактерий. Тест рассчитан на выявление только активной формы туберкулеза вне зависимости от его локализации.

Данное исследование подходит для пациентов с иммунодефицитами различного происхождения (ВИЧ, онкологией), так как тест-система позволяет обнаружить иммуноглобулины всех трех классов (G, M, A).

Необходимо воздержаться от приема пищи в течение 2-3 часов.

Оставьте комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *